水牛ghrelin基因原核表达载体构建与蛋白表达  

作　　者：农微[1,2] 谢婉[2] 朱思燃 秦津[2] 崔月明[2] 李爱友[2] 谢体三[2] 

机构地区：[1]广西中医药大学,广西南宁530005 [2]广西大学动物科学技术学院,广西南宁530005

出　　处：《畜牧与兽医》2016年第12期76-78,共3页Animal Husbandry & Veterinary Medicine

基　　金：广西自然科学基金资助项目(2014GXNSFBA118140);广西大学科研基金资助项目(XBZ130294)

摘　　要：为了研究水牛ghrelin基因的结构与功能,本试验对水牛ghrelin基因进行原核表达载体构建与融合蛋白表达条件的优化。采用RT-PCR方法从水牛胃组织的总RNA中扩增出ghrelin编码区,连接到pRSET-a载体中,转化大肠杆菌BL21(DE3),挑取阳性克隆子,用IPTG进行诱导表达条件的优化。结果表明,成功构建原核表达载体pRSET-a-ghrelin,在2 mmol/L IPTG,37℃的条件下诱导表达4 h,水牛ghrelin重组蛋白可成功获得表达,经SDS-PAGE鉴定发现,ghrelin融合蛋白主要以包涵体形式存在,分子量约为20 ku,其表达量占总菌体蛋白量的35%。本试验结果为进一步研究水牛ghrelin基因的结构和功能提供有价值的生物学信息。

关 键 词：GHRELIN 水牛 基因克隆 原核表达 

分 类 号：S855.3[农业科学—临床兽医学]