结肠癌细胞组织因子／活性凝血因子Ⅶ通路活化后的基因表达谱改变  

Analysis of mRNA expression profile of colon cancer cells after activating tissue factor/active coagu- lation factor Ⅶ signalling

作　　者：陈贺凯 汤坚强[1] 汪欣[1] 万远廉[1] 

机构地区：[1]北京大学第一医院普外科,100034

出　　处：《中华实验外科杂志》2017年第1期9-13,共5页Chinese Journal of Experimental Surgery

基　　金：国家自然科学基金（81272710、30801092）

摘　　要：目的 利用人类全转录组基因芯片技术检测人SW620结肠癌细胞组织因子/活性凝血因子Ⅶ（TF/FⅦa）通路激活后表达谱改变，探讨该通路下游机制。方法 提取TF/FⅦa通路活化组与空白对照组的人结肠癌SW620细胞总RNA进行全转录组基因芯片杂交，筛选差异表达基因，实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR）验证结果，进行差异基因及相关通路网络分析；RT-qPCR检测结肠癌细胞SW620、SW480、LoVo、HCT116的TF/FⅦa通路活化后表皮生长因子受体（EGFR）配体双调蛋白（AREG）、表皮调节素（EREG）、肝素结合表皮生长因子（HB-EGF）、转化生长因子-α（TGF-α）、β-细胞素（BTC）、表皮生长因子（EGF）、上皮细胞有丝分裂蛋白（EPGN）的基因表达改变。结果TF/FⅦa通路活化组较对照组上/下调≥1.5倍的基因共263个，其中上调150个，下调113个；网络分析提示层粘连蛋白-整合素系统、糖代谢通路网络和恶性肿瘤通路网络与TF/FⅦa通路活化密切相关；SW620细胞TF/FⅦa通路活化后EGFR配体AREG、EREG、HB-EGF、TGF-α基因表达呈时间依赖的上调趋势，于12 h达峰值，相对表达量分别为0.92±0.13比5.50±0.91（P＝0.000），1.00±0.15比2.17±0.44（P＝0.002），1.11±0.08比1.73±0.32（P＝0.005），0.94±0.12比1.49±0.09（P＝0.002）；TF/FⅦa通路活化6 h，SW480细胞的AREG、BTC基因表达显著上调，相对表达量分别为1.00±0.25比2.19±0.60（P＝0.033），1.00±0.23比4.41±0.56（P＝0.001），EPGN基因未检测到；LoVo细胞的AREG、BTC显著上调，EGF显著下调，分别为1.00±0.19比1.87±0.39（P＝0.025），1.00±0.01比1.86±0.06（P＝0.000），1.00±0.08比0.68±0.16（P＝0.035）；HCT116细胞的AREG、EREG、HB-EGF、TGF-α、EGF均显著上调，分别为1.00±0.09比1.38±0.06（P＝0.004），1.00±0.02比1.14±0.03（P＝0.003），1.00±0.03比1.85±0.11（P＝0.000），1.00±0.05比1.26±0.10（P＝0.015），Objective To detect the expression profile changes of human colon cancer cell SW620 when its tissue factor/active coagulation factor VII （TF/FⅦa） pathway is activated and discover new down- stream effeetors of TF/FⅦa pathway. Methods Total RNAs of two groups of SW620 cells （ treated with 100 nmol/L FⅦa for 24 h in treament group and identical volume of phosphate - buffered saline in control group） were extracted and hybridization was performed on gene chips. Differentially expressed genes were screened and part of the gene expressions were verified using real - time reverse transeriptase - polymerase chain reaction （ RT - qPCR） , network of differentially expressed genes and pathways were analysed. Gene expressions of epidermal growth factor receptor （EGFR） ligands amphiregulin （AREG）, epiregulin （EREG）, Heparin - binding EGF - like growth factor （ HB - EGF ）, transforming growth factor - α （TGF - α）, β - cellulin （ BTC）, epidermal growth factor （EGF） and epigen （EPGN） were detected by RT -qPCR following activation of TF/FⅦa pathway of SW620, SW480, LoVo and HCT116 cells. Results There were 263 differentially expressed genes with a test/control fold change of ≥ 1.5 （150 upregulated,113 downregulated）. Network analysis showed that genes of laminin -integrin system, pathways of glyco- metabolism and cancer related pathways were associated with TF/FⅦ a signalling＇ s activation. Gene ex- pressions of AREG, EREG, HB - EGF and TGF - α of SW620 were upregulated in a time - dependent manner and reached peaks at 12 h, relative gene expressions of control group vs treatment group were 0.92±0. 13 vs. 5.50±0.91（P=0.000）, 1.00 ±0. 15 vs. 2. 17 ±0.44（P=0.002） , 1.11 ±0.08 vs. 1.73 ±0. 32（P =0. 005）, 0. 94±0. 12 vs. 1.49±0. 09（P =0. 002）. When TF/FⅦa pathway was activated for 6 h, in SW480 cells, gene expressions of AREG and BTC were significantly upregnlated, relative expressions were 1.00±0. 25 vs. 2. 19 ±0. 60（P =0. 033）, 1.00 �

关 键 词：结直肠癌 表达谱 组织因子 表皮生长因子受体 

分 类 号：R735.35[医药卫生—肿瘤]