试管捕捉实时荧光RT-PCR法同时检测烟草花叶病毒病和马铃薯Y病毒病  

作　　者：任锡毅 刘永翔[1,2] 黄永会[1,2] 刘作易[2,3] 

机构地区：[1]贵州省生物技术研究所,贵州贵阳550006 [2]贵州省农业生物技术重点实验室,贵州贵阳550006 [3]贵州省农业科学院,贵州贵阳550006

出　　处：《江苏农业科学》2017年第6期96-100,共5页Jiangsu Agricultural Sciences

基　　金：中国烟草总公司贵州公司科技项目(编号:201111)

摘　　要：为建立一套简单、快速、有效的病毒病检测方法,避开病毒病检测中分子生物学方法检测时RNA提取这一复杂、费时、费力的过程,且能在同一个反应中同时检测多种病毒病,对我国常见的2种烟草病毒的外壳蛋白基因部分序列设计引物和Taq Man探针,结合实时荧光逆转录PCR(RT-PCR)和试管捕捉RT-PCR法,对实时荧光RT-PCR法加以改进,与双抗夹心酶联免疫法(double antibody sandwich enzyme-linked immunosorbant assay,简称DAS-ELISA)和试管捕捉RT-PCR法进行比较,并在此基础上构建多重试管捕捉实时荧光RT-PCR检测体系。结果首次成功构建能同时检测烟草花叶病毒和马铃薯Y病毒的多重试管捕捉实时荧光RT-PCR检测体系。该技术无须提取RNA,包括叶片研磨、捕捉、反转录、荧光PCR扩增等步骤,简单快捷、省时省力,具有高效性、系统性和经济简便性等特点。

关 键 词：烟草花叶病毒 马铃薯Y病毒 实时荧光RT-PCR 检测 

分 类 号：S435.72[农业科学—农业昆虫与害虫防治]