基于氨基柱的高效液相色谱-示差折光检测器方法分析媚丽葡萄香气糖苷的糖基组成  

Analysis of Glycosyls Profile of Aroma Glycosides in Meili Grape by High Performance Liquid Chromatography-Refractive Index Detector with Amino Column

作　　者：汪兴杰 张予林[1] 刘吉彬[1] 陶永胜[1,2] 

机构地区：[1]西北农林科技大学葡萄酒学院,杨凌712100 [2]陕西省葡萄与葡萄酒工程技术研究中心,杨凌712100

出　　处：《分析化学》2017年第5期681-686,共6页Chinese Journal of Analytical Chemistry

基　　金：国家十三五重点研发计划(No.2016YFD0400504-01);国家自然科学基金项目(No.31371724)资助~~

摘　　要：建立了基于氨基柱的高效液相色谱分析媚丽葡萄香气糖苷的糖基组成的方法。媚丽葡萄果皮经提取缓冲液(0.1 mol/L Na_2HPO_4-NaH_2PO_4,pH 7.0,13%(V/V)乙醇)浸提,葡萄香气糖苷提取物在柠檬酸-磷酸盐缓冲液(pH 5.0)中用AR2000糖苷酶水解,释放出糖基,经氨基柱分离,用高效液相色谱-示差折光检测器(HPLC-RID)分析。色谱分析条件为:柱温35℃,RID温度35℃,进样量20μL,流动相为乙腈-乙酸乙酯-水(60:25:15,V/V),流速1.0 mL/min。结果表明,鼠李糖、木糖、阿拉伯糖、芹菜糖和葡萄糖在线性范围内线性关系良好(R^2>0.996),检出限为93~123 mg/L,定量限309~409 mg/L,5 g/L各单糖的峰面积的精密度(n=10)为2.3%~6.4%;糖基样品的各单糖加标回收率在73.8%~125.7%之间。以糖基类别划分的媚丽葡萄各类香气糖苷的摩尔百分比为:6-O-α-L-吡喃鼠李糖基-β-D-吡喃葡萄糖苷,4.1%~6.1%;6-O-β-D-吡喃木糖基-β-D-吡喃葡萄糖苷,2.3%~8.8%;6-O-α-L-呋喃阿拉伯糖基-β-D-吡喃葡萄糖苷,0.1%~3.9%;6-O-α-L-呋喃芹菜糖基-β-D-吡喃葡萄糖苷,5.5%~9.8%;6-O-β-D-吡喃葡萄糖基-β-D-吡喃葡萄糖苷,76.3%~86.8%。媚丽葡萄成熟过程中,各类香气糖苷的含量及其总量与浆果成熟度之间没有明显的相关性。A high performance l iquid c hr omatogr aphy method based on amino c o lu m n to u n c o v e r t h e g ly c o s y ls of aroma glycosides in Mei l i grape wa s es t abl i shed . Me i l i g r a p e s w e r e s am p le d f rom Y a n g l i n g , S h a a n x i province , China . Aroma glycosides i n gr a pe s k in s we r e e x t r a c t e d b y e x t r a c t io n b u f f e r （0. 1 m o l /L N a gH P O ^/NaH2PO4,pH 7.0, 13% ethanol （ V/ V ））, t he n e n z yma t ic a l ly h y d ro ly s e d b y A R 2000 e n z ym e p r e p a r a t io n in citrate-phosphate buffer （pH 5.0）, and the g ly c o s y ls l ib e r a t e d w e r e i s o l a t e d b y am in o c o l u m n , a n d d e te rm in e d by high performance liquid chr omatogr aphy- r ef r act ive in d e x d e t e c to r （ H P L C -R ID ）. T h e H P L C -R ID experimental conditions were developed a s f ol lows： amin o c o lumn t emp e r a tu r e 35益,R ID t em p e r a tu r e 35益,injection volume 20 滋 L,mobi le phase acet oni t r i l e/ et hyl a c e t a t e /wa t e r = 60：25：15 （ V/V） ,f low r a t e 1 m L/m i n .The results showed that the r easonable l ine a r i ty wa s a c h i e v e d f o r r h a mn o s e , x y lo s e , a r a b i n o s e , a p io s e a n d glucose （R 2〉0.996） , wi th the det ect ion l imi t （LOD ） o f 93-123 mg ^ L a n d q u a n t i t a t io n l im i t （L O Q ） o f 309-409 mg/L . The relative standard deviat ion （ RSD , c =10） o f th e p e a k s o f e a c h m o n o s a c c h a r id e （5 g/L ） w a s 2.3%-6.4% , and the recoveri es r anged f rom 73. 8 % to 125. 7%. T h e m o la r p e r c e n t a g e s o f th e a r om a glycosides in Meili grape wer e 4. 1 % - 6 . 1 % f o r 6 - O -α- L - r h amn o p y r a n o s y l- 8 - D - g l u c o p y r a n o s i d e ,2. 3% -8 . 8 % for 6 - O -8 - D - xylopyranosyl- 8 - D - gluc opyr a nos i de , 0. 1 % -3. 9 % f o r 6 - O -β- L - a r a b in o f u r a n

关 键 词：葡萄香气糖苷 糖基组成 氨基柱 高效液相色谱-示差折光检测器 

分 类 号：O657[理学—分析化学] TS255.7[理学—化学]