三重荧光PCR检测食源性致病菌方法的建立与初步应用  

作　　者：谢海燕[1] 蔡奕琪[1] 张端秀[1] 徐振娜[1] 洪伟彬[1] 

机构地区：[1]东莞市动物疫病预防控制中心,广东东莞523086

出　　处：《中国兽医杂志》2017年第3期86-89,共4页Chinese Journal of Veterinary Medicine

基　　金：广东省科技计划项目(2013B020410006)

摘　　要：根据大肠杆菌O157的rfbE基因、志贺肠杆菌ipaH基因、单增李斯特杆菌hlyA基因的保守序列,设计引物和探针,通过优化反应体系,测定其灵敏度、特异性和重复性,建立了可同时检测上述3种食源性致病菌的多重实时荧光PCR方法。试验结果显示,该方法对大肠杆菌O157、志贺肠杆菌、单增李斯特杆菌进行3联扩增的相对灵敏度检测限分别为5×10~2、5×10~2和5×10~3CFU/mL;对10株标准/参考菌株的检测结果,只有目的菌株呈阳性反应;用该方法检测26份冻肉样品,与传统的细菌分离鉴定法结果一致,说明研究建立的方法是鉴定3种食源性致病菌的有效方法。

关 键 词：大肠杆菌O157 志贺氏肠杆菌 单增李斯特杆菌 三重荧光PCR 方法建立 初步应用 

分 类 号：S855.99[农业科学—临床兽医学]