检索规则说明:AND代表“并且”;OR代表“或者”;NOT代表“不包含”;(注意必须大写,运算符两边需空一格)
检 索 范 例 :范例一: (K=图书馆学 OR K=情报学) AND A=范并思 范例二:J=计算机应用与软件 AND (U=C++ OR U=Basic) NOT M=Visual
作 者:卞赛赛 梁琳[2] 高窦 周灵[2,3] 李沛然[3] 杨双双[3] 雷程红[1] 崔尚金[2] 刘维全[3]
机构地区:[1]新疆农业大学动物医学学院,新疆乌鲁木齐830052 [2]中国农业科学院北京百牧罟医讲究所,北京100193 [3]中国农业大学生物学院,北京100193
出 处:《中国兽医科学》2017年第5期597-602,共6页Chinese Veterinary Science
基 金:国家高技术研究发展计划(863)项目(2011AA10A213);中国农业科学院创新工程项目(ASTIP-IAS15)
摘 要:利用原核表达系统表达水貂肠炎细小病毒(MEV)VP2衣壳蛋白,以制备抗VP2超免疫血清。根据VP2的基因序列,设计1对特异性引物,以MEV全基因组重组质粒p B-MEV-L为模板,利用PCR技术扩增出MEV VP2片段,并定向克隆到pET-32a载体中,经酶切与序列测定,证明成功构建了VP2基因原核表达质粒pET-MEV-VP2。将其转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导后实现了高效表达。免疫印迹试验表明,获得的重组蛋白具有较好的反应原性。以该蛋白为免疫原免疫新西兰兔,制备抗血清,四免后用ELISA方法检测其效价达到1∶1 024。免疫荧光试验证明,获得的抗体具有良好的结合活性。为MEV的病原生物学研究奠定基础。The study aims to express the capsid protein VP2 of mink parvovirus in Escherichia coli(E.coli) and prepare its anti-serum. At first,according to the sequence of VP2 gene,two specific primers were designed. The recombinant plasmid pB-MEV-L with full length MEV genome was used as template in PCR amplification. After insertion of VP2 gene into prokaryotic expression vector pET-32a,the recombinant plasmid pET-MEV-VP2 was constructed successfully. Then transformation of pET-MEV-VP2 into E.coli BL21(DE3) and high expression was induced by IPTG. After 4 times immunization with the purified VP2 protein,the antiserum titer for ELISA was 1 : i 024. The result of immunofluorescence assay showed that the rabbit antiserum had a good combined activity. All the results laid a solid foundation for further study of the biological characteristics of MEV.
分 类 号:S852.659.2[农业科学—基础兽医学]
正在载入数据...
正在载入数据...
正在载入数据...
正在载入数据...
正在载入数据...
正在载入数据...
正在载入数据...
正在链接到云南高校图书馆文献保障联盟下载...
云南高校图书馆联盟文献共享服务平台 版权所有©
您的IP:216.73.216.56