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作 者:杨利[1] 石昂 李新果[1] 李双双[1] 时庆贺 郑关民[1] 王玉国[1] 陈陆[1] 王川庆[1]
机构地区:[1]河南农业大学牧医工程学院,河南郑州450002
出 处:《河南农业科学》2017年第6期120-124,共5页Journal of Henan Agricultural Sciences
基 金:国家自然科学基金项目(31272567);河南省高校科技创新人才支持计划项目(14HASTIT022);河南省高校科技创新团队支持计划项目(14IRTSTHN015)
摘 要:为研究伪狂犬病病毒(PRV)的致病机制,将PRV QBA株按0.5个感染复数(MOI)的剂量接种PK-15细胞,分别在感染后0、1、2、4、6、8、12、24 h收取细胞并提取microRNA(miRNA),采用茎环引物实时荧光定量PCR(RT-q PCR)检测prv-miR-LLT11a的表达时相。RT-q PCR扩增结果显示,熔解曲线峰值单一,扩增曲线拐点清晰。RT-q PCR检测结果表明,PRV QBA株感染PK-15细胞1 h后,prv-miR-LLT11a表达量极显著升高,随后表达量下调,在感染6 h后表达量降至最低,感染8 h后表达量持续急剧升高。In order to study the pathogenic mechanism of pseudorabies virus (PRY) , PK-15 cells were in -fected with PRY QBA strain at 0. 5 M0I,and cells were harvested and microRNA( miRNA) were extrac-ted at 0,1 ,2 ,4,6,8,12 ,24 hours post infection( hpi). Then the temporal expression of prv-miR-LLTl 1 a was detected by stem-loop real-time quantitative PCR ( RT-qPCR) . The amplification results of RT-qPCR showed that the melting curve had a single peak and a clear inflection point. RT-qPCR data showed that the expression of prv-miR-LLTl 1 a remarkably significant increased in PK-15 cells after 1 hour infection with PRY QBA strain, then decreased. Its expression level decreased to the lowest level at 6 hpi, and in-creased significantly after 8 hpi.
关 键 词:伪狂犬病病毒 prv-miR-LLT11a 茎环RT-q PCR 表达时相
分 类 号:S855.3[农业科学—临床兽医学]
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