龙爪槐SRAP-PCR反应体系的建立与优化  

作　　者：倪雅楠[1] 刘博[1] 

机构地区：[1]中央民族大学生命与环境科学学院,北京100081

出　　处：《江苏农业科学》2017年第11期19-22,共4页Jiangsu Agricultural Sciences

基　　金：国家自然科学基金(编号:31400182;31400192);中央民族大学一流大学一流学科建设项目(编号:YLDX01013)

摘　　要：以龙爪槐(Sophora japonica f.pendula Hort.)叶片为材料,采用L_(16)(4~5)正交设计试验,对SRAP-PCR反应体系中的Mg^(2+)、dNTPs、Taq DNA聚合酶、引物和模板DNA用量5个因素进行优化,并确立适用于龙爪槐SRAP-PCR反应的最佳体系。结果表明,龙爪槐SRAP-PCR反应的最佳体系为反应总体积12.5μL,Taq酶0.10 U、Mg^(2+)3.0 nmol/L、dNTPs 2.5 nmol/L、正反向引物均为1.2 nmol/L、DNA 100ng,其余体积用ddH_2O补足。各因素水平变化对反应体系的影响影响大小依次为引物、模板DNA、Mg^(2+)、dNTPs、Taq酶。用35个龙爪槐样品对优化体系进行验证,均得到条带清晰、多态性丰富的图谱,证实了该体系的稳定性。

关 键 词：龙爪槐 SRAP-PCR 正交试验 反应体系优化 

分 类 号：S687.01[农业科学—观赏园艺]