马铃薯EcoRⅠ/MseⅠ内切酶组合AFLP反应体系的优化与引物筛选  

作　　者：李建武[1,2] 李灏德 文国宏[1,2] 李高峰[1,2] 马胜[1,2] 张荣[1,2] 贾小霞[1,2] 齐恩芳[1,2] 

机构地区：[1]甘肃省农业科学院马铃薯研究所,甘肃兰州730070 [2]农业部西北旱作马铃薯科学观测实验站,甘肃渭源748201 [3]甘肃农业大学生命科学技术学院,甘肃兰州730070

出　　处：《江苏农业科学》2017年第15期25-29,共5页Jiangsu Agricultural Sciences

基　　金：国家自然科学基金(编号:31160299);甘肃省青年科技基金(编号:1308RJYA047);甘肃省农业科学院农业科技创新专项(编号:2013GAAS43)

摘　　要：以2个马铃薯品种为材料,对AFLP反应过程中的关键因素(DNA浓度、酶切体系、扩增体系等)进行了优化,旨在建立适合马铃薯的EcoRⅠ/MseⅠ内切酶组合的AFLP反应体系和筛选扩增条带丰富的引物。结果发现,优化的马铃薯AFLP反应体系为37℃酶切4 h,37℃连接4 h,连接产物稀释10倍用于预扩增,预扩增产物稀释30倍用于选择性扩增。利用建立的优化反应体系,以10个甘肃省主栽马铃薯品种为材料,从256对引物组合中筛选出24对扩增条带多、条带清晰、多态性好的引物组合。

关 键 词：马铃薯 AFLP 体系建立与优化 引物筛选 

分 类 号：S532.01[农业科学—作物学]