pEGFP-N1-MeCP2上调质粒的构建及意义  

作　　者：罗军强 陈治军[1] 刘平非[1] 冯雨[1] 谢腾[1] 

机构地区：[1]荆门市第一人民医院神经外科,湖北荆门448000 [2]荆门市五三医院外科,湖北荆门431821

出　　处：《长江大学学报（自然科学版）》2017年第24期48-52,共5页Journal of Yangtze University(Natural Science Edition)

基　　金：湖北省自然科学基金项目(2014CFB09);湖北省荆门市科技计划项目(2013S01);湖北省荆门市科技计划项目(2015S01);荆门市重点科技计划项目(YFZD2016045)

摘　　要：目的:构建MeCP2真核表达载体并在SH-SY5Y细胞中表达。方法:采用RT-PCR、pEGFP-N1-MeCP2质粒提取、Western blot检测pEGFP-N1-MeCP2在在SH-SY5Y细胞中的表达。结果:将重组质粒pEGFP-N1-MeCP2与pEGFP-N1空载体组分别转染至SH-SY5Y细胞中,48h后利用Western Blot检测表明,转染pEGFP-N1-MeCP2的细胞在82kDa处可见一特异性的表达带,为MeCP2与GFP的融合蛋白,而在空载体组未见条带;在27KDa附近,空载体组可见条带,而转染pEGFP-N1-MeCP2的细胞未见条带,提示pEGFP-N1-MeCP2载体能够在SH-SY5Y细胞中表达。结论:构建pEGFP-N1-MeCP2上调质粒是进一步研究MeCP2蛋白功能的基础,也是研究MeCP2蛋白在帕金森病中作用机制的关键。

关 键 词：帕金森病 MECP2 TH SH-SY5Y细胞 6-OHDA 

分 类 号：R34[医药卫生—基础医学]