MLAA-22基因上游调控区的分离及启动子活性分析  

Upstream regulatory region of MLAA-22 gene: Isolation and promoter activity analysis

作　　者：崔鹤[1,2] 张王刚[2] 

机构地区：[1]内蒙古医科大学附属医院血液内科,内蒙古呼和浩特010059 [2]西安交通大学第二附属医院血液内科,陕西西安710004

出　　处：《现代肿瘤医学》2018年第4期489-493,共5页Journal of Modern Oncology

基　　金：国家自然科学基金资助项目(编号:81100374)

摘　　要：目的:分离MLAA-22基因上游转录调控区序列,进行启动子活性鉴定。方法:人工合成MLAA-22基因上游转录调控区序列MLAA-22(-999^+1)和MLAA-22(-1999^+1)两个区段,将两个区段插入到双荧光素酶报告基因表达载体psi CHECK-2的BglⅡ/Nhe I限制性内切酶位点中,构建双荧光素酶报告基因表达质粒,将重组质粒分别命名为psi CHECK-2-MLAA-22(-999^+1)和psi CHECK-2-MLAA-22(-1999^+1);采用双荧光素酶报告基因系统检测所分离区段的启动子活性。结果 :MLAA-22(-999^+1)和MLAA-22(-1999^+1)两个区段均具有较强的相对荧光素酶活性,并且MLAA-22(-999^+1)区段的相对荧光素酶活性明显高于MLAA-22(-1999^+1)区段。结论:MLAA-22基因上游转录调控区(-999^+1)区段将是今后我们进行MLAA-22基因上游转录调控区启动子活性研究的重点区域。Objective：To isolate the upstream transcriptional regulatory region of MLAA-22 gene,identify promoter activities of the isolated regions.Methods：-999-＋1 and-1999-＋1 of MLAA gene＇ s upstream transcriptional regulatory region were synthesized and inserted into BglⅡ and NheI restriction sites of dual-Luciferase reporter gene vector psiCHECK to construct recombinant plasmids.The recombinant plasmids were named psiCHECK-2-MLAA-22（-999-＋1） and psiCHECK-2-MLAA-22（-1999-＋1） respectively.The promoter activities of isolated regions were detected by dual-Luciferase reporter gene system.Results：Both MLAA-22（-999-＋1） and MLAA-22（-1999-＋1） displayed high luciferase activity.Besides,the luciferase activity of MLAA-22（-999-＋1） of was stronger than that of MLAA-22（-1999-＋1）.Conclusion：The （-999-＋1） region will be the key region for the study of promoter activity of MLAA-22 gene＇ s upstream transcriptional regulatory region in future.

关 键 词：MLAA-22基因 转录调控区 双荧光素酶报告基因 启动子 

分 类 号：R733.71[医药卫生—肿瘤]