低氧诱导因子-1α对Jurkat细胞端粒酶逆转录酶影响的研究  

Study on the Effect of Hypoxia Inducible Factor-1 Alpha on Telomerase Reverse Transcriptase in Jurkat Cells

作　　者：应晓杨[1] 方美云[2] 王晨辰 韩丽 徐艳冰 张卫军[1] 

机构地区：[1]大连大学附属中山医院,辽宁大连116001 [2]大连医科大学附属第一医院,辽宁大连116011

出　　处：《现代诊断与治疗》2017年第24期4520-4523,共4页Modern Diagnosis and Treatment

基　　金：大连市卫生局课题项目(WSJ/KJC-01-JL-01)

摘　　要：目的探讨RNA干扰白血病细胞株Jurkat低氧诱导因子-1α(HIF-1α)对端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)的影响,并检测其对端粒酶活性、细胞增殖及凋亡的影响,为白血病的基因治疗提供理论基础。方法构建人低氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因的短发夹RNA(sh RNA)真核表达载体并转染白血病细胞株Jurkat;采用RT-PCR方法检测Jurkat细胞HIF-1α及hTERT m RNA表达水平;EIESA法检测端粒酶的活性,流式细胞术分析转染后Jurkat细胞的细胞周期和凋亡率。结果成功构建了pshRNA-HIF-1αl和pshRNA-HIF-1α2重组质粒;转染Jurkat细胞后,与空质粒组相比,pshRNA HIF-1α可有效抑制Jurkat细胞HIF-1α及hTERT基因表达;流式细胞术结果表明转染后,其凋亡率明显高于空质粒组(P<0.05),Jurkat细胞增殖活性显著降低。结论成功构建HIF-1α的sh RNA表达质粒,转染Jurkat细胞后能表达sh RNA,干扰效果明确,目的基因的表达明显下降,从而可以抑制白血病细胞Jurkat的增殖,促进凋亡。

关 键 词：SHRNA 表达质粒 HIF-1α HTERT 转染 

分 类 号：R733.7[医药卫生—肿瘤]