C-sis基因对过氧化氢诱导大鼠肝细胞凋亡的抑制作用  

作　　者：张弘英[1] 胡树根 元文峰 丁浩[1] 

机构地区：[1]南昌大学第二附属医院消化内科,江西南昌330006 [2]南昌新建区人民医院,江西南昌330100 [3]乐安县人民医院内二科,江西抚州344300

出　　处：《广东医学》2018年第3期346-349,共4页Guangdong Medical Journal

基　　金：国家自然科学基金资助项目(编号:81300348);江西省青年科学基金资助项目(编号:20151BAB215006);江西省教育厅科学技术研究项目(编号:GJJ150259);江西省卫计委科技计划项目(编号:20165199)

摘　　要：目的探讨大鼠C-sis基因对过氧化氢(H_2O_2)诱导肝细胞凋亡的影响。方法使用脂质体转染法把重组质粒pc DNA3.1/C-sis和空载质粒pc DNA3.1转染进入正常大鼠肝细胞株BRL细胞,转染后的6~8 h用浓度为200μmol/L的H_2O_2处理细胞,作用48 h后收获细胞。细胞分为正常对照组、空载质粒组、C-sis质粒组、H_2O_2组、空载质粒+H_2O_2组、C-sis质粒+H_2O_2组。利用荧光定量PCR检测C-sis的m RNA表达;利用Western blot检测C-sis的蛋白表达和Caspase3活性;利用CCK8检测细胞活力;利用TUNEL检测细胞凋亡;利用流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期。结果与正常对照组和空载质粒组相比,C-sis质粒组的C-sis m RNA和蛋白表达水平显著升高(P均<0.01)。与正常对照组相比,H_2O_2组的细胞活力明显下降(P<0.01),激活型Caspase3蛋白明显升高(P<0.01);与空载质粒+H_2O_2组相比,C-sis质粒+H_2O_2组的细胞活力升高(P<0.01),激活型Caspase3蛋白降低(P<0.05)。TUNEL结果显示,与正常对照组相比,H_2O_2组的细胞凋亡明显升高(P<0.01);与空载质粒+H_2O_2组相比,C-sis质粒+H_2O_2组的细胞凋亡明显降低(P<0.01)。流式细胞术结果显示,与正常对照组相比,H_2O_2组的细胞凋亡率明显升高(P<0.01);与空载质粒+H_2O_2组相比,C-sis质粒+H_2O_2组的细胞凋亡明显降低(P<0.01)。各组之间的细胞周期没有明显区别(P>0.05)。结论 C-sis基因能抑制H_2O_2诱导的肝细胞凋亡,并促进其生长。

关 键 词：C-SIS 过氧化氢 BRL细胞 凋亡 

分 类 号：R575.3[医药卫生—消化系统]