多功能融合酶基因Linker的优化及表达  

作　　者：王锐丽[1] 刘敏杰[1] 薛业敏[2] 

机构地区：[1]信阳农林学院生物技术系,河南信阳464000 [2]南京师范大学金陵女子学院,江苏南京210097

出　　处：《江苏农业科学》2016年第4期31-36,共6页Jiangsu Agricultural Sciences

基　　金：河南省科技攻关项目(编号:132102110047)

摘　　要：在融合酶阿拉伯/木糖苷酶-木聚糖酶(Xar-xynA)之间插入不同组成和长度的多肽Linker,避免催化结构域相互之间的干扰,改善融合酶的催化效率。5个含不同长度及Ala/Gly比例连接肽Linker的融合突变体在大肠杆菌重组表达、纯化,并对融合酶的酶学性质、动力学参数和酶解作用进行研究。结果表明,融合酶Xar-L1/L2/L3-xynA和融合酶Xar-xynA有着相似的最适温度和最适pH值。其中融合酶Xar-L1-xynA在65~80℃和pH值6.6~8.2有更强的阿拉伯/木糖苷酶热稳定性和pH值稳定性,将融合酶Xar-L1-xynA在65℃保温60 min其阿拉伯/木糖苷酶活性有着明显的激活现象。并获得连接Xar和XynA的最优Linker:L1和L4,麦麸和玉米芯木聚糖产物酶解试验的结果表明,融合酶Xar-L1-xynA和Xar-L4-xynA比其他的融合酶有着更高的催化效率。

关 键 词：多功能性酶 基因融合 木糖苷酶/阿拉伯糖苷酶 木聚糖酶 连接肽 

分 类 号：Q786[生物学—分子生物学]