大鼠GABAA受体β2亚基真核表达质粒的构建及鉴定  

作　　者：王彦玲 刘永 刘英奎 胡书群 

机构地区：[1]徐州医科大学医学技术学院,江苏徐州221004 [2]江苏省脑病生物信息重点实验室,江苏徐州221004 [3]徐州医科大学生命科学学院,江苏徐州221004 [4]徐州医科大学麻醉学院急诊医学实验室,江苏徐州221004

出　　处：《中国科技纵横》2019年第16期187-188,共2页China Science & Technology Overview

基　　金：江苏省自然科学基金(BK20181471);江苏省普通高校研究生科研创新计划项目(CXLX11_0727).

摘　　要：目的:构建并鉴定大鼠GABAAR(γ-氨基丁酸A受体)β2亚基真核表达质粒。方法:以大鼠GABAARβ2亚基基因的cDNA序列为依据设计.上游、下游引物,以大鼠总RNA为模板,RT-PCR扩增目的基因片段,经T载体定向克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+),酶切后电泳、测序检测克隆情况。将阳性克隆质粒转染至HEK293细胞,免疫印迹检测蛋白表达情况。结果:GABAAR β2亚基基因扩增成功,并被连接至pcDNA3.1(+),且测序结果与所查CDS序列一致。免疫印迹结果显示,转染后的细胞采用WB方法检测到过表达的GABAAR β2蛋白。结论:β2-pcDNA3.1(+)真核表达质粒构建成功,并可在HEK293细胞中过表达。

关 键 词：GABAA受体 真核表达 质粒构建 

分 类 号：Q784[生物学—分子生物学]