质粒构建

作品数：440被引量：525H指数：8
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基于PCR技术的高产木糖醇工程菌重组质粒的构建和鉴定
《生物学教学》2025年第2期53-58,共6页肖宏伟 叶有员 刘欣 
通过“构建高产木糖醇工程菌”这一实际问题的研究,基于PCR实验原理,引导学生创新性地解决研究中的问题:在引物末端设计添加所需限制酶切位点,实现同源序列的扩增和阳性菌落的鉴定。在此过程中提升学生关键能力和生物学学科核心素养。PC...
关键词：PCR技术 质粒构建 工程菌 高产木糖醇 高中生物学 
CRMP1基因慢病毒干扰质粒构建及其对SH-SY5Y细胞NLRP3炎症小体蛋白表达的影响
《中国免疫学杂志》2025年第2期433-438,共6页王松豪 秦坤 韩雨 张微微 徐绍业 邵晓云 
广西自然科学基金(2021GXNSFAA075004,2022GXNSFAA035456,2017GXNSFAA198003);桂林医学院硕士研究生科研项目(GYYK2023009)。
目的:构建靶向坍塌反应调节蛋白1(CRMP1)基因的慢病毒干扰质粒,建立稳定敲减CRMP1的人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)稳转细胞系,探讨其对NLRP3炎症小体蛋白表达的影响。方法:以h-CRMP1 mRNA为靶序列设计合成shRNA双链,克隆至PLKO.1载体,构...
关键词：坍塌反应调节蛋白1 慢病毒干扰 人神经母细胞瘤细胞 NLRP3炎症小体 
钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ质粒的构建和表达及其与Ca_(V)1.2通道结合的鉴定
《中国医科大学学报》2025年第1期1-4,11,共5页王红梅 王祥卉 张文竹 何蕊 廖天佐 高青华 郝丽英 
国家自然科学基金(32271160);辽宁省科学技术计划(2022JH2/20200069);赤峰市自然科学基金(SZR24098);中国医科大学大学生创新创业训练计划(S202410159081)。
目的构建钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)长片段的融合蛋白质粒,表达、提取、纯化,并鉴定其与Ca_(V)1.2通道蛋白的结合。方法将提取的pGEX-6p-1/CaMKⅡ长片段质粒转化到原核大肠杆菌BL21感受态细胞,摇床培养箱中培养12 h,添加异丙...
关键词：钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ 质粒构建 分离 纯化 pull-down 
重组猫IFN-α的质粒构建、真核表达及体外抗病毒活性分析
《中国动物传染病学报》2024年第6期17-24,共8页李沛恒 邹万成 陈竞 张国庆 崔春梅 蒋嵘 金宁一 李昌 
中国医学科学院与健康科技创新工程项目(2020-I2M-5-001)。
本文为探究猫IFN-α(FeIFN-α)在体外MDCK、F81细胞中的抗病毒效果,为后续体内实验提供参考。根据猫IFN-α(GenBank登录号:NP_001027000.1)序列并添加6×His标签,合成后通过pUC57载体进行克隆,然后亚克隆至pcDNA3.1载体,获得含有目的基...
关键词：猫IFN-α 构建与表达 抗病毒活性 干扰素刺激基因 
牦牛KSR2基因的双荧光素酶质粒构建及其与bta-miR-22-3p的靶向验证
《高原农业》2024年第5期540-547,共8页王硕 张敬博 刘瑞冬 任晓丽 董海龙 
西藏自治区自然科学基金项目(No.XZ202101ZR0024G);西藏农牧学院2024年重点学科建设项目(XK2024-02)。
为了鉴定牦牛体内bta-miR-22-3p与KSR2之间的靶向关系,本研究采用miRNA Base数据库对牦牛体内bta-miR-22-3p的序列进行分析,并用Target scan软件预测牦牛bta-miR-22-3p于KSR2基因的3’UT R可能存在的结合位点,然后采用PCR扩增出包含bta-...
关键词：bta-miR-22-3p KSR2 双荧光素酶 牦牛 
pSETsac B质粒构建及其对达卡气单胞菌kdp E基因的有痕与无痕敲除效率评价
《热带生物学报》2024年第4期452-459,共8页凌博 陈丽青 王宇 杨诺 范丽霞 郭桂英 李雪松 曾纪锋 李迁 郑继平 
国家自然科学基金(32060788,32060131);海南省自然科学基金(321MS007,821MS029,821RC1052,2019RC084)。
为构建一种新型基因敲除质粒,以pSET4s和pK18mobsac B质粒为基础,通过PCR和酶切连接的方法,构建了新质粒pSETsac B,然后以pK18mobsac B质粒为对照,评价新建质粒对达卡气单胞菌kdp E基因的有痕敲除(带有四环素筛选标记)和无痕敲除效率。...
关键词：pSETsac B kdp E基因 基因敲除 
β淀粉样蛋白_(1-42)质粒的构建及其与钙调蛋白的结合作用被引量：1
《中国医科大学学报》2024年第6期495-500,共6页齐爽 孙旋旋 王绮萱 贺意婷 李佳睿 苏敬阳 郝丽英 
辽宁省大学生创新训练项目(S202210159031,S20231015944,S202310159018);医学电生理学教育部重点实验室开放基金(KeyME-2019-07)。
目的探讨β淀粉样蛋白_(1-42)(Aβ_(1-42))与钙调蛋白(CaM)的结合作用。方法采用生物信息学方法获取阿尔茨海默病(AD)异常表达的核心基因,预测AD防治的潜在靶蛋白;通过基因重组的方法构建GST-Aβ_(1-42)重组质粒并进行DNA测序;琼脂糖凝...
关键词：Β淀粉样蛋白 质粒构建 钙调蛋白 结合能力 活性鉴定 
表达SFTSV Gn基因的重组5型腺病毒的构建与鉴定
《黑龙江畜牧兽医》2024年第9期8-12,17,共6页张璇 王新宇 刘宇婷 涂影叶 梁耀文 易昌华 殷国平 
国家自然科学基金委员会重大研究计划项目(92169106)。
为了构建出表达新布尼亚病毒(SFTSV)Gn基因的重组5型腺病毒,试验根据GenBank上发表的SFTSV Gn基因序列(登录号为ADZ04482.1)设计合成引物,采用特异性PCR方法在Gn基因前添加了KOZAK序列和tPA信号肽序列;然后通过酶切、连接等方法构建重...
关键词：新布尼亚病毒 Gn基因 重组5型腺病毒 质粒构建 HEK 293细胞 
NDUFS6蛋白生物信息学分析及过表达质粒的构建与鉴定
《宁夏医科大学学报》2024年第4期353-359,共7页张瑜 孙美琪 徐方晶 王洁 方克宝 王一帆 何军 
宁夏自然科学基金项目(2023AAC02070,2023A2237)。
目的 应用生物信息学方法分析线粒体呼吸链复合体Ⅰ结构亚基烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶(泛素)铁硫蛋白6(NDUFS6)的理化性质,构建pCV702-NDUFS6过表达质粒并进行鉴定,为进一步研究NDUFS6蛋白功能奠定基础。方法 利用Expasy、UniProtKB、...
关键词：烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶(泛素)铁硫蛋白6 生物信息学分析 心肌细胞 质粒构建 
EML3与H3K4M融合蛋白表达质粒的构建及蛋白的表达与纯化
《中国科技论文在线精品论文》2024年第1期79-90,共12页王卓文 刘艳丽 
国家自然科学基金(32271309)。
目的:研究获得N端/C端融合组蛋白H3K4M小肽的EML3融合蛋白的方法。方法:将组蛋白H3(aa1~15)小肽编码区融合进表达EML3 Agenet结构域重组质粒中,得到N端/C端融合表达H3K4M的质粒,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中。经扩大培养,加入IPTG后在15...
关键词：微生物药物学 组蛋白H3K4M小肽 EML3 Agenet结构域 融合蛋白 质粒构建 蛋白表达纯化 
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