传染性法氏囊病病毒VP5基因的克隆及表达  

Colning,Expression and Purification of IBDV VP5 Gene

作　　者：马静云[1] 曹永长[1] 毕英佐[1] 

机构地区：[1]华南农业大学动物科学学院,广东广州510642

出　　处：《中国预防兽医学报》2002年第6期405-407,共3页Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine

基　　金：国家自然科学基金资助项目 (39870 5 5 0 )

摘　　要：利用PCR技术扩增编码IBDVVP5基因的DNA片段 ,进而构建了T7启动子控制下的N端His_Tag融合表达质粒pRSESTA_VP5 ,通过测序证明序列正确后 ,转化进大肠杆菌BL2 1(DE3) ,用IPTG进行诱导表达 ,SDS_PAGE分析结果表明 ,融合蛋白 (约 2 8kDa)在BL2 1中得到高效表达 ,表达产物约占菌体蛋白的 35 %。主要以包涵体形式存在 ,通过金属离子 (Ni2 +)螯合亲和层析纯化 ,得到纯度在 90 %以上的电泳纯表达产物VP5。这些结果为进一步研究IBDVVP5的结构与功能、其在IBD中的作用机理奠定了良好的基础。A DNA fragment encoding IBDV vp5 was amplified by using PCR technique,and then was inserted into a N_terminal His_Tag fusion exprssion plasimd(termed pRSETA_vp5)which was based on T7 expression system,and sequenced.The recombinant plasimd was transformed into E.coli BL21(DE3)and induced with IPTG.SDS_PAGE analyses showed the fusion protein VP5 was efficiently expressed and mainly exised as inclusion bodies.By immobilized Ni2+_chelating affinity chromatography,the His_Tag VP5 was purified directly from bacterial lysate.

关 键 词：传染性法氏囊病病毒 VP5基因 基因克隆 基因表达 传染性法兰氏囊病 PCR 

分 类 号：S852.659.4[农业科学—基础兽医学]