微小RNA-98-5p靶向高迁移率族蛋白A2对胃癌细胞上皮-间充质转化的影响  

Effect of microRNA-98-5p-5p targeting high mobility group A2 on epithelial-mesenchymal transition in gastric cancer cells

作　　者：张虎 王耿泽[1] 厉冰[1] 顾亮亮[2] 尚华[3] 张森[1] 朱元增[4] 王钧[1] Zhang Hu;Wang Gengze;Li Bing;Gu Liangliang;Shang Hua;Zhang Sen;Zhu Yuanzeng;Wang Jun(Department of General Surgery,Nanyang Central Hospital,Nanyang 473000,China;Department of Neurology,Nanyang Central Hospital,Nanyang 473000,China)

机构地区：[1]南阳市中心医院普外科,473000 [2]南阳市中心医院神经内科三病区,473000 [3]南阳市中心医院心血管内科特需病区,473000 [4]河南省人民医院胃肠外科,郑州450000

出　　处：《中华实验外科杂志》2020年第3期430-433,共4页Chinese Journal of Experimental Surgery

摘　　要：目的观察微小RNA(miRNA,miR)-98-5p靶向高迁移率族蛋白A2(HMGA2)对胃癌细胞上皮-间充质转化(EMT)的影响并探讨其作用机制。方法采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测GES-1、BGC-823、SGC-7901、MGC-803细胞(购自中国科学院上海细胞库和ATCC细胞库)中miR-98-5p的mRNA表达水平;构建绿色荧光蛋白(GFP)-NC和GFP-miR-98-5p慢病毒稳定细胞株,采用生物信息学和双荧光素酶报告基因验证miR-98-5p和HMGA2的靶向关系;采用蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞中HMGA2、E-钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达;采用Transwell检测细胞的侵袭能力。组间比较采用t检验,计数资料采用率(%)表示,组间比较采用χ2检验。结果与GES-1细胞(1.94±0.16)比较,BGC-823(0.41±0.03)、SGC-7901(0.53±0.05)、MGC-803(0.50±0.04)细胞中miR-98-5p的mRNA相对表达水平下降,差异有统计学意义(t=7.437、6.288、6.305,P<0.05)。双荧光素酶报告基因检测显示,与GFP-NC细胞比较(1.77±0.12),转染HMGA2-WT后GFP-miR-98-5p细胞(0.42±0.05)的相对荧光素酶活性下调(t=6.701,P<0.05),差异有统计学意义。Western blot结果显示,GFP-NC、GFP-miR-98-5p、GFP-miR-98-5p+pcDNA和GFP-miR-98-5p+HMGA2细胞中HMGA2的表达水平分别为2.15±0.17、0.44±0.05、0.46±0.04、2.30±0.19;Vimentin的表达水平分别为1.85±0.13、0.47±0.04、0.45±0.05、1.39±0.09;E-cadherin的表达水平分别为0.36±0.03、1.60±0.11、1.65±0.10、0.72±0.05。与GFP-NC细胞比较,miR-98-5p过表达细胞中HMGA2和Vimentin的表达下降,E-cadherin的表达增加(t=8.032、7.981、8.692,P<0.05),差异有统计学意义;Transwell结果显示,与GFP-NC细胞[(88.17±9.16)个]比较,GFP-miR-98-5p细胞[(33.34±5.53)个]的侵袭个数下降(t=4.231,P<0.05),差异有统计学意义;与GFP-miR-98-5p细胞[(34.66±5.39)个]比较,GFP-miR-98-5p+HMGA2细胞[(62.51±7.03)个]的侵袭个数上调(t=3.858,P<0.05),差异有统计学意义。结论miR-98-5p在胃癌细胞中低表达,miR-98-5p过表

关 键 词：微小RNA-98-5p 胃癌 高迁移率族蛋白A2 波形蛋白 E-钙黏蛋白 侵袭 

分 类 号：R735.2[医药卫生—肿瘤]