柴胡皂苷d对氧化应激诱导的人肝星状细胞活化后ROS形成及NLRP3炎性小体表达的影响  

作　　者：张娜[1] 晏旎 周蒙恩 李勇[1] 

机构地区：[1]上海中医药大学附属市中医医院,上海200071

出　　处：《时珍国医国药》2020年第4期805-809,共5页Lishizhen Medicine and Materia Medica Research

基　　金：国家自然科学基金(81573775)。

摘　　要：目的观察柴胡皂苷d(SSd)对氧化应激诱导的人肝星状细胞LX-2活化后细胞内ROS形成、NLRP3炎性小体表达的影响,探讨NLRP3炎性小体活化的上游信号,及SSd对线粒体ROS-NLRP3信号通路的调控作用,为SSd在治疗肝纤维化疾病的应用提供临床依据。方法体外培养人肝星状细胞LX-2,采用H2O2活化LX-2细胞,干预组加入线粒体阻断剂MitoTEMPOL、中药单体SSd孵育24h后再经过H2O2处理细胞,采用线粒体膜电位(JC-1)检测、ATP检测观察线粒体受损情况;ROS检测观察活性氧生成情况;Western blot法、RT-PCR法检测细胞NLRP3、ASC、Caspase-1的表达。结果与对照组比较,JC-1检测、ATP检测显示LX-2活化后(单纯H2O2组)因细胞增殖JC-1显示红色荧光为主、ATP水平明显升高(细胞功能正常),P<0.01,ROS生成增多(P<0.01),NLRP3、ASC、Caspase-1的蛋白及基因表达随之升高(P<0.05,P<0.01)。线粒体阻断剂MitoTEMPOL作用LX-2 24h后H2O2处理细胞,JC-1显示仍红色色荧光为主,SSd作用LX-2 24h后H2O2处理细胞,JC-1显示绿色荧光为主(细胞增殖受抑制),两组细胞ATP水平较单纯H2O2组明显下降(细胞功能异常),P<0.01,线粒体ROS生成减少(P<0.01),NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白水平及基因水平表达明显降低(P<0.01)。结论线粒体来源的ROS是NLRP3炎性小体活化的上游信号,SSd下调ROS-NLRP3信号通路。

关 键 词：柴胡皂苷D 肝星状细胞 氧化应激 ROS NLRP3炎性小体 

分 类 号：R284[医药卫生—中药学]