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机构地区:[1]烟台市莱阳中心医院病理科,265200 [2]潍坊市人民医院病理科,261041
出 处:《国际医药卫生导报》2020年第20期3067-3070,共4页International Medicine and Health Guidance News
摘 要:目的探讨Brachyury上调基质金属蛋白酶(MMPs)与促进肺癌细胞转移的机制。方法购置H1299细胞、H460细胞,完成细胞的转染及稳转细胞的培养;选择对数生长期的H1299细胞、H460细胞,利用Lipofectamine2000转染、干扰,构建si-RNA对Brachyury表达,形成shRNA-NC、shRNABrachyury细胞,设定对照细胞。采用实时荧光PCR技术测定不同细胞中MMPs mRNA表达水平;采用Transwell法检测3种细胞0 h、24 h、48 h及72 h细胞侵袭能力;采用Western blot测定3种稳转细胞Brachyury水平。结果shRNA-Brachyury细胞中MMPs12、24、7、9水平均高于shRNA-NC细胞、H460细胞,差异均有统计学意义(均P<0.05);shRNA-NC细胞中MMPs12、24、7、9水平均低于H460细胞,差异均有统计学意义(均P<0.05);Transwell检测结果表明,H460细胞、shRNA-NC细胞侵袭率比较,差异无统计学意义(P>0.05);shRNA-Brachyury细胞侵袭能力低于H460细胞、shRNA-NC细胞,差异有统计学意义(P<0.05);Western blot测定结果表明,shRNA-Brachyury细胞中Brachyury蛋白水平高于shRNA-NC、H460细胞,差异均有统计学意义(均P<0.05);shRNA-NC细胞中Brachyury蛋白水平低于H460细胞,差异有统计学意义(P<0.05)。结论Brachyury能通过上调MMPs水平促进肺癌细胞转移,从而能促进疾病的发生、发展,有望成为肺癌新的治疗靶点。
关 键 词:BRACHYURY 基质金属蛋白酶 肺癌细胞 转移 实时荧光PCR技术 Transwell法 Western blot
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