靶向乳酸脱氢酶A(LDHA)对T细胞急性淋巴细胞白血病具有抗白血病作用  

作　　者：于海智 尹亚飞 易艺芳 程钊[1,2] 旷文勇 李睿娟[1,2] 钟海莹[1,2] 崔亚娟[1,2] 袁玲俐 龚凡杰[1,2] 王志华 李姮[1,2] 彭宏凌[1,2,7] 张广森[1,2] 

机构地区：[1]中南大学湘雅二医院血液内科,湖南长沙410011 [2]中南大学分子血液病研究中心,湖南长沙410011 [3]呼吸与重症医学科,国家卫生健康委肺脏免疫性疾病诊治重点实验室,贵州大学人民医院,贵州省人民医院,贵州贵阳550002 [4]血液科,湘潭中心医院,湖南湘潭411100 [5]血液科,湖南省人民医院,湖南师范大学第一附属医院,湖南长沙410005 [6]血液科,湖南省儿童医院,湖南长沙410005 [7]肿瘤模型与个体化诊治研究湖南省重点实验室,湖南长沙410011

出　　处：《癌症》2021年第1期24-40,共17页Chinese Journal of Cancer

基　　金：国家自然科学基金(No.81200368、81670160);湖南省自然科学基金(No.2017JJ2355)的资助

摘　　要：背景与目的T细胞急性淋巴细胞白血病(T-cell acute lymphoblastic leukemia,T-ALL)是急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)中少见且具侵袭性的一种亚型。在T-ALL患者的血清中,乳酸脱氢酶A(lactate dehydrogenase A,LDHA)的活性增高。我们推测靶向LDHA可以作为改善T-ALL患者预后的一个潜在治疗策略。本研究旨在研究LDHA靶向治疗对T-ALL的抗白血病作用及其潜在的分子机制。方法用LDH抑制剂草氨酸盐处理原代T-ALL细胞系Jurkat和DU528。采用MTT、克隆形成、凋亡及细胞周期检测分析草氨酸盐对T-ALL细胞的作用。采用定量实时PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)和Western blotting检测相关的信号通路。采用活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)检测试剂盒检测分析草氨酸盐处理后的T-ALL细胞中的ROS产量。用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建了LDHA基因敲减的T-ALL转基因斑马鱼模型,采用TUNEL、Western blotting及T-ALL肿瘤进展检测分析LDHA基因敲减对T-ALL转基因斑马鱼模型的影响。结果草氨酸盐显著抑制了Jurkat和DU528的细胞增殖,诱导了细胞凋亡,同时也引起了Jurkat和DU528细胞周期G0/G1期阻滞,刺激了ROS的生成(P<0.001)。阻断LDHA显著减低了c-Myc基因及蛋白的表达,也降低了磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3′-kinase,PI3K)信号通路上的磷酸化丝氨酸/苏氨酸激酶(phos-phorylated serine/threonine kinase,AKT)和糖原合成酶激酶3β(glycogen synthase kinase 3 beta,GSK-3β)的表达。在T-ALL转基因斑马鱼中,LDHA基因敲减减缓了疾病进展,下调了c-Myc的mRNA和蛋白表达。结论靶向LDHA对T-ALL表现出抗白血病的作用,可作为一种对T-ALL的潜在的治疗策略。

关 键 词：CRISPR/Cas9基因编辑 LDHA 草氨酸盐 T细胞淋巴细胞白血病 转基因斑马鱼模型 

分 类 号：R733.71[医药卫生—肿瘤]