内蒙古绒山羊Wnt10b干扰载体的构建及鉴定  

作　　者：吴子贤 吴静 王荣 周健 王瑞雪 刘俊阳 刘佳森 赵艳红[1] 

机构地区：[1]内蒙古农业大学动物科学学院,内蒙古呼和浩特010018 [2]内蒙古乌兰察布市商都县职业技术学校,内蒙古乌兰察布013450 [3]内蒙古自治区农牧业科学院畜牧研究所,内蒙古呼和浩特010031

出　　处：《中国畜牧杂志》2021年第5期203-206,共4页Chinese Journal of Animal Science

基　　金：国家自然科学基金(31860628、31460588、31560624);内蒙古自然基金(2017MS0304、2020LH03020)。

摘　　要：本研究旨在利用内蒙古绒山羊Wnt10b基因构建干扰质粒并转染耳皮肤细胞检测基因表达。以1岁龄内蒙古绒山羊为研究对象,扩增Wnt10b基因CDS序列,连接到pSGU6载体,构成pSGU6-Wnt10b重组质粒,并使用感受态细胞大量扩增提取,所得质粒转染至生长状态良好的内蒙古绒山羊耳皮肤细胞中,提取RNA利用Real Time PCR技术检测细胞中Wnt10b基因表达情况。结果显示:pSGU6-Wnt10b干扰载体经测序鉴定证明构建成功,转染至耳皮肤细胞24 h后出现绿色荧光,并在48 h后荧光强度最高,转染效率达到最大,实验组中Wnt10b mRNA表达量显著低于对照组。

关 键 词：内蒙古绒山羊 耳皮肤细胞 细胞增殖 Wnt10b 质粒构建 脂质体转染 QRT-PCR 

分 类 号：S827.2[农业科学—畜牧学]