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机构地区:[1]徐州医科大学附属连云港市第一人民医院体检中心,江苏连云港222000 [2]徐州医科大学附属连云港市第一人民医院检验科,江苏连云港222000 [3]徐州医科大学附属连云港市第一人民医院妇产科,江苏连云港222000
出 处:《中国老年学杂志》2021年第10期2171-2175,共5页Chinese Journal of Gerontology
摘 要:目的探讨微小RNA(miR)-572对宫颈癌细胞增殖、凋亡的影响及其作用靶点。方法体外培养宫颈癌细胞株Hela与正常宫颈细胞株Ect1/E6E7。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-572及WW结构域的氧化还原酶基因(WWOX)mRNA表达水平;Western印迹检测WWOX蛋白表达水平。将anti-miR-572、anti-miR-NC分别转染至Hela细胞,分别为anti-miR-572组、anti-miR-NC组。构建pcDNA3.1-WWOX过表达载体转染至Hela细胞。双荧光素酶报告基因实验检测miR-572对WWOX基因的靶向调控。将WWOX siRNA(si-WWOX)、阴性对照siRNA(si-NC)转染至anti-miR-572组Hela细胞中,分别为anti-miR-572+si-WWOX组、anti-miR-572+si-NC组。噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞增殖;流式细胞术检测各组细胞凋亡。采用Western印迹法检测各组Hela细胞中WWOX蛋白表达水平。结果Hela细胞中miR-572表达水平显著高于Ect1/E6E7细胞(P<0.05),WWOX mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与anti-miR-NC组相比,anti-miR-572组Hela细胞增殖率明显降低(P<0.05),细胞凋亡率显著升高(P<0.05);WWOX过表达后可抑制Hela细胞增殖活性并提高细胞凋亡率;双荧光素酶报告基因实验表明WWOX是miR-572的靶基因;与anti-miR-572+si-NC组相比,anti-miR-572+si-WWOX组WWOX蛋白表达水平及细胞凋亡率显著降低(P<0.05),细胞增殖率显著升高(P<0.05)。结论miR-572可直接靶向调控WWOX从而抑制宫颈癌细胞增殖、促进凋亡。
关 键 词:微小RNA-572 WW结构域的氧化还原酶基因 宫颈癌 细胞增殖 细胞凋亡
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