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作 者:张鹏[1,2]
机构地区:[1]上海大学医学院,上海200444 [2]复旦大学基础医学院
出 处:《解剖学杂志》2021年第S01期164-164,共1页Chinese Journal of Anatomy
摘 要:RPE细胞的EMT在增殖性玻璃体视网膜病变(PVR)的发生发展中起关键作用,但金属调节转录因子-1(MTF-1)在RPE细胞EMT过程中有何作用仍缺乏研究。本研究以人视网膜细胞株ARPE-19细胞为对象,通过慢病毒CRISPR/Cas9nickase载体介导的基因编辑技术敲减MTF-1表达,应用细胞培养、免疫荧光、Westernblotting、流式细胞术、MTT方法、Transwell小室和划痕试验等技术,对MTF-1基因在RPE细胞增殖、细胞周期、细胞迁移中的作用及其信号通路进行了研究。研究发现敲减MTF-1基因对RPE细胞的EMT具有显著逆转作用,主要表现为:①上皮细胞标志物cytokeratin7和E-cadherin等明显上调,而间质标志物N-cadherin、vimentin和β-catenin下调;②显著抑制ARPE-19细胞的增殖和迁移,并影响ZnCl2对EMT相关蛋白表达的诱导作用和APTO-253对EMT相关蛋白表达的抑制作用;③敲减MTF-1基因还可通过影响细胞周期引起细胞凋亡;④ZnCl2对KLF4的表达有抑制作用,而诱导c-myc和CDK6的表达.
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