一种同时培养原代神经元和原代星形胶质细胞的实验方法  

作　　者：薛建锋 魏娜 杨淳 

机构地区：[1]贵州医科大学临床医学院病理学教研室,贵阳550000 [2]贵州医科大学附属医院病理科,贵阳550000

出　　处：《临床与实验病理学杂志》2021年第12期1479-1482,共4页Chinese Journal of Clinical and Experimental Pathology

基　　金：国家自然科学基金(U1812403-6、81560512)。

摘　　要：目的建立一种简便实用的可同时提取原代神经元和原代星形胶质细胞的培养方法。方法选用出生24 h的SD乳鼠,75%乙醇消毒,断脊法处死。用眼科镊拨开脑膜各层,取出完整大脑。游离海马,剥离血管,木瓜蛋白酶消化,然后吹打、离心、过滤,以合适密度种植于相应培养皿。4 h后更换培养基,以后每2天半量换液培养。第5天用免疫荧光法鉴定细胞种类,计算神经元纯度;第7天待神经元形成网络后进行后续实验。将剩余大脑皮层进行胶质细胞的提取。用同样方法剥除脑膜、血管,胰酶消化,过滤,差速贴壁。以合适密度种植于培养瓶,用梯度血清法纯化细胞。第7天后,鉴定并计算星形胶质细胞纯度,选5代之内的细胞进行后续实验。结果提取的原代神经元和神经胶质细胞形态良好,杂质少,纯度高,纯度分别为(95±0.62)%和(94±0.73)%,可以用于后续的实验。结论该方法所需试剂和设备简单,提取的细胞纯度高、质量好,是一种方便实用的可以同时进行原代神经元与原代星形胶质细胞培养的方法。

关 键 词：海马 神经元 星形胶质细胞 细胞培养 原代培养 

分 类 号：R361[医药卫生—病理学]