miR-23a-3p对MPP +诱导的帕金森病细胞模型的功能机制  

作　　者：黄景贺[1] 贾贺[2] 李富慧[1] 陈艳芳[1] 

机构地区：[1]南阳市中心医院神经内科,河南南阳473000 [2]郑州大学第二附属医院老年病科

出　　处：《中国老年学杂志》2022年第2期442-446,共5页Chinese Journal of Gerontology

摘　　要：目的探讨微小RNA-23a-3p(miRNA-23a-3p)对1-甲基-4-苯基-吡啶离子(MPP+)诱导帕金森病细胞模型增殖及凋亡的影响。方法用不同浓度的MPP+诱导SH-SY5Y细胞建立帕金森病细胞模型,采用CCK-8法检测SH-SY5Y细胞存活率,筛选MPP+适宜作用浓度。采用qRT-PCR法检测细胞中miRNA-23a-3p的表达。将SH-SY5Y细胞分为control组MPP++miR-23a-3p组、MPP++miR-con组、MPP++miR-23a-3p+pcDNA-control组、MPP++miR-23a-3p+pcDNA-SNCA组,采用qRT-PCR法检测转染效果。流式细胞术检测miRNA-23a-3p对SH-SY5Y细胞凋亡的影响;双荧光素酶报告实验检测miRNA-23a-3p与SNCA的靶向关系;Western印迹法检测Bax、Bcl-2、SNCA蛋白表达。检测细胞中ROS水平及LDH活力。结果MPP+处理后SH-SY5Y细胞存活率显著降低(P<0.05),miRNA-23a-3p的表达水平显著降低(P<0.05),选取4 mmol/L MPP+进行后续研究;与control组相比,MPP+组细胞凋亡率显著升高(P<0.05),ROS水平与Bax表达水平显著升高(P<0.05),LDH活性明显增强(P<0.05),而Bcl-2表达水平显著降低(P<0.05);上调SH-SY5Y细胞中miRNA-23a-3p表达可明显提高细胞存活率及Bcl-2表达水平(P<0.05),而明显降低ROS水平、Bax表达水平、LDH活性及细胞凋亡率(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验证实SNCA是miRNA-23a-3p的靶基因;SNCA过表达可逆转miR-23a-3p对MPP+诱导的SH-SY5Y细胞存活率、凋亡率、细胞毒性的作用。结论上调miR-23a-3p表达可通过靶向抑制SNCA的表达进而对MPP+诱导的帕金森病细胞模型发挥保护作用。

关 键 词：帕金森病 miR-23a-3p SNCA 凋亡 

分 类 号：R742.5[医药卫生—神经病学与精神病学]