阿帕替尼联合阿霉素对外周T细胞淋巴瘤的抑制作用及机制研究  

Inhibitory effects of apatinib combined with adriamycin on peripheral T-cell lymphoma cells and its mechanism

作　　者：左轶朗 欧阳周 周辉 ZUO Yilang;OUYANG Zhou;ZHOU Hui(Graduate Collaborative Training Base of Hunan Cancer Hospital,Hengyang Medical School,University of South China,Hengyang,Hunan,421001,China;Hunan Cancer Hospital/the Affiliated Cancer Hospital of Xiangya School of Medicine,Central South University,Changsha,Hunan,410013,China)

机构地区：[1]南华大学衡阳医学院,湖南省肿瘤医院研究生协作培养基地,湖南衡阳421001 [2]湖南省肿瘤医院/中南大学湘雅医学院附属肿瘤医院,湖南长沙410013

出　　处：《肿瘤药学》2022年第1期36-45,共10页Anti-Tumor Pharmacy

基　　金：湖南省自然科学基金项目(2018JJ6024)。

摘　　要：目的探讨抗血管生成药物阿帕替尼与常用化疗药物阿霉素联合应用对外周T细胞淋巴瘤Hut78细胞株的抑制作用以及相关分子作用机制,为开发外周T细胞淋巴瘤治疗新方法提供实验依据。方法将Hut78细胞分为不同浓度药物处理组:阿帕替尼单药(10、20、40、60μmol·L^(-1))、阿霉素单药(1、2、4μmol·L^(-1))、阿帕替尼+阿霉素[(40+1)μmol·L^(-1)、(40+2)μmol·L^(-1)、(60+1)μmol·L^(-1)、(60+2)μmol·L^(-1)],分别作用72 h,采用CCK-8法检测药物对细胞的增殖抑制作用。采用流式细胞术检测不同浓度药物处理组{阿帕替尼单药(40μmol·L^(-1))、阿霉素单药(1、2μmol·L^(-1))、阿帕替尼+阿霉素[(40+1)μmol·L^(-1)、(40+2)μmol·L^(-1)]}作用24 h后对Hut78细胞凋亡的影响。采用流式细胞术检测不同浓度阿帕替尼(10、20、40μmol·L^(-1))作用24 h后对Hut78细胞周期的影响。采用蛋白印迹法检测不同浓度药物处理组{阿帕替尼单药(40μmol·L^(-1))、阿霉素单药(1、2μmol·L^(-1))、阿帕替尼+阿霉素[(40+1)μmol·L^(-1)、(40+2)μmol·L^(-1)]}作用24 h后,Hut78细胞中PI3K/Akt信号转导通路相关蛋白PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt及凋亡相关蛋白Bcl-2、Casepase-3、Bax的表达变化。结果不同浓度(10、20、40、60μmol·L^(-1))的阿帕替尼作用72 h后,细胞抑制率分别为(13.42±2.19)%、(19.52±4.16)%、(31.49±3.16)%、(52.88±3.37)%,72 h的IC_(50)值为(59.34±0.31)μmol·L^(-1),各药物处理组与对照组两两比较,差异具有统计学意义(χ^(2)=10.116,P=0.018);不同浓度(1、2、4μmol·L^(-1))的阿霉素分别作用72 h后,细胞抑制率分别为(15.82±3.23)%、(31.70±4.79)%、(42.34±5.23)%,72 h的IC_(50)值为(5.52±0.18)μmol·L^(-1),各药物处理组与对照组两两比较,差异具有统计学意义(χ^(2)=10.532,P=0.015);阿帕替尼+阿霉素[(40+1)μmol·L^(-1)、(40+2)μmol·L^(-1)、(60+1)μmol·L^(-1)、(60+2)μmol·L^(-1)]作用72 h的细胞抑制率分别为(51.70±2.09)%、(5Objective To explore the inhibitory effects of the anti-angiogenic drug apatinib and the commonly used chemotherapy drug adriamycin on the peripheral T-cell lymphoma (PTCL) cell line Hut78 and the related molecular mechanisms,in order to provide relevant experimental basis for the development of new treatment methods for PTCL.Methods Hut78 cells were divided into several groups with drug treatment of different concentrations:apatinib single agent (10,20,40,60μmol·L^(-1));adriamycin single agent (1,2,4μmol·L^(-1));apatinib+adriamycin[(40+1)μmol·L^(-1),(40+2)μmol·L^(-1),(60+1)μmol·L^(-1),(60+2)μmol·L^(-1)].After treatment for 72 h,CCK-8 method was used to detect the inhibitory effects of drugs on the cell proliferation.Flow cytometry was used to detect the effects of drugs on the apoptosis of Hut78 cells in different concentrations treatment groups{apatinib single agent (40μmol·L^(-1)),adriamycin single agent (1,2μmol·L^(-1)),apatinib+adriamycin[(40+1)μmol·L^(-1),(40+2)μmol·L^(-1)]}after24 h,as well as the effects on the cell cycle of Hut78 cells in groups with different concentrations of apatinib (10,20,40μmol·L^(-1))after 24 h.Western blotting was used to detect the expressions of PI3K/Akt signal pathway-related proteins (PI3K,p-PI3K,Akt and p-Akt) and apoptosis-related proteins (Bcl-2,Casepase-3 and Bax) in Hut78 cells in groups with different concentrations of drugs{apatinib single agent (40μmol·L^(-1)),adriamycin single agent (1,2μmol·L^(-1)),apatinib+adriamycin[(40+1)μmol·L^(-1),(40+2)μmol·L^(-1)]}after 24 h.Results After treated with different concentrations (10,20,40,60μmol·L^(-1)) of apatinib for 72 h,the inhibition rates of Hut78 cells were (13.42±2.19)%,(19.52±4.16)%,(31.49±3.16)%,(52.88±3.37)%,respectively.The IC_(50)value at 72 h was (59.34±0.31)μmol·L^(-1),and the differences were statistically significant between each treatment group and the control group (χ^(2)=10.116,P=0.018).After treated with different concentrations (1,2,4μmol·L^(-1)) of adriamycin for 7

关 键 词：阿帕替尼 阿霉素 外周T细胞淋巴瘤 血管内皮生长因子 

分 类 号：R733.4[医药卫生—肿瘤]