基于全内反射显微镜的荧光漂白后恢复实验方法建立  

作　　者：曹慧珍 王瑾瑜[1] 王文娟[1] 

机构地区：[1]清华大学生物医学测试中心尼康生物影像中心,北京100084

出　　处：《科技与创新》2022年第5期133-137,共5页Science and Technology & Innovation

基　　金：清华大学第四届实验室创新基金(编号:53100100519)。

摘　　要：发展了基于全内反射显微镜的荧光漂白后恢复(TIR/FRAP)的成像方法,该方法通过全内反射显微镜(TIRFM)和激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)的联合使用,将全内反射荧光成像和荧光漂白后恢复技术相结合,可广泛用于研究质膜附近分子动力学特征。LSCM对任意感兴趣区域(ROI)执行光漂白,TIRFM特异性采集漂白前后细胞质膜附近的荧光信号,通过NIS-Elements软件程序实现显微镜模式间的自动快速切换。相比目前通用的基于全内反射的光漂白方法,这种方法具备灵活可变漂白区域的优势,可以满足大多数的基于全内反射的光漂白后恢复实验需求。同时,这种技术方法也为开发TIRFM或LSCM与其他设备的联用方法奠定了实践基础。

关 键 词：全内反射显微镜 荧光漂白后恢复 自动切换 感兴趣区域 

分 类 号：Q336[生物学—遗传学]