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作 者:蒋玲 夏玉芳[1] 于啸[1] 孙欣[1] 文小玲 娄艳辉[1]
出 处:《中华妇产科杂志》2022年第4期301-306,共6页Chinese Journal of Obstetrics and Gynecology
摘 要:目的探讨长链基因间非编码RNA-重编程调节因子(Linc-ROR)及微小RNA 181a-5p(miR-181a-5p)在卵巢高级别浆液性癌(HGSOC)组织中的表达, 并探讨两者对卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞恶性生物学行为的影响及作用机制。方法 (1)收集2019年6月—2021年6月在青岛大学附属医院行手术治疗的36例HGSOC患者, 以同期因子宫肌瘤行子宫全切除+双侧附件切除术(输卵管和卵巢正常)的26例患者作为对照。实时荧光定量PCR技术检测HGSOC组织、正常输卵管伞端及正常卵巢组织中Linc-ROR和miR-181a-5p的表达, 分析两者的相关性及与HGSOC患者手术病理分期和淋巴结转移的关系。(2)应用生物信息学软件预测Linc-ROR与miR-181a-5p的靶向关系, 并采用双荧光素酶实验验证。采用小分子干扰RNA(siRNA)技术分别沉默和过度表达卵巢癌细胞系SKOV3细胞中Linc-ROR的表达, 实验分为4组, Linc-ROR-NC组(即阴性对照)、Linc-ROR-p组(即过度表达Linc-ROR)、Linc-ROR-si组(即沉默Linc-ROR表达)、Linc-RORsi+miR-181a-5p-si组(即同时沉默Linc-ROR和miR-181a-5p表达)。实时荧光定量PCR技术检测转染后4组SKOV3细胞中Linc-ROR和miR-181a-5p的表达, 细胞克隆形成实验、划痕实验及穿膜(transwell)小室实验分别检测转染后4组SKOV3细胞的增殖、迁移和侵袭能力。蛋白印迹(western blot)法检测转染后4组SKOV3细胞中Wnt通路相关蛋白β-连环蛋白(β-catenin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)的表达。结果 (1)HGSOC组织中Linc-ROR的表达水平为3.77±0.13, 显著高于正常卵巢组织和正常输卵管伞端组织(分别为1.00±0.21、1.08±0.26;P均<0.01);HGSOC组织中miR-181a-5p的表达水平为0.38±0.12, 显著低于正常卵巢组织和正常输卵管伞端组织(分别为1.03±0.21、1.01±0.20;P均<0.01)。HGSOC组织中Linc-ROR与miR-181a-5p表达呈显著负相关(r=-0.979, P<0.01);Linc-ROR、miR-181a-5p的表达水平与HGSOC患者的手术病理分期、淋巴结转�
关 键 词:SKOV3细胞 恶性生物学行为 正常卵巢组织 卵巢上皮性癌 输卵管伞端 实时荧光定量PCR技术 子宫全切除 微小RNA
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