齐墩果酸联合5氟尿嘧啶通过调控JNK信号通路影响肝癌细胞中钙离子的表达  

作　　者：董静[1] 王玉[1] 陈萍[1] 吕艳欣[1] 李鹏辉[1] 张嵩[1] 任晓旭[1] 刘雅楠[1] 

机构地区：[1]齐齐哈尔医学院细胞生物学教研室,齐齐哈尔161000

出　　处：《临床与实验病理学杂志》2022年第9期1123-1126,共4页Chinese Journal of Clinical and Experimental Pathology

基　　金：黑龙江省教育厅项目(2018-KYYWF-0116)。

摘　　要：目的探讨齐墩果酸(oleanolic acid,OA)/5氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5FU)协同对肝癌细胞内Ca^(2+)表达水平的影响及其对JNK通路诱导细胞凋亡的作用机制,为临床治疗提供可靠的依据。方法通过MTT和集落形成实验评估各用药组在肝癌细胞BEL-7402中的作用;采用Ca^(2+)荧光探针检测肝癌细胞中Ca^(2+)分布,并通过流式细胞术分析Ca^(2+)表达水平;采用免疫荧光染色检测肝癌细胞中Ca^(2+)通道相关蛋白Grp75的表达;通过Hoechst 33342染色检测肝癌细胞的凋亡情况;通过Western blot检测Ca^(2+)通道相关蛋白和细胞凋亡相关蛋白的表达。结果在JNK信号通路抑制剂SP600125作用下,与空白组比较,OA/5FU协同显著降低了体外肝癌细胞的生存活力(P<0.05);克隆结果表明:与空白组比较,OA/5FU协同可抑制肝癌细胞的集落形成能力(P<0.01);Ca^(2+)荧光探针检测结果显示:与空白组比较,OA/5FU协同可增加肝癌细胞内Ca^(2+)的表达水平(P<0.01)。免疫荧光结果显示:与空白组比较,OA/5FU协同可降低Ca^(2+)通道相关蛋白Grp75的表达。Hoechst 33342染色结果表明:与空白组比较,OA/5FU协同可诱导肝癌细胞凋亡。Western blot结果显示:与空白组比较,OA/5FU协同可调控Grp75、PDI、VDAC1、BCL-2、Bax、cl-Caspase3蛋白的表达,抑制肝癌细胞增殖并诱导细胞凋亡。结论OA/5FU协同可诱导肝癌细胞凋亡、抑制细胞增殖,其机制可能是通过调控JNK信号通路影响肝癌细胞内Ca^(2+)的表达水平从而达到抗肿瘤作用。

关 键 词：肝肿瘤 齐墩果酸 5氟尿嘧啶 钙离子 C-JUN氨基末端激酶 

分 类 号：R735.7[医药卫生—肿瘤]