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检 索 范 例 :范例一: (K=图书馆学 OR K=情报学) AND A=范并思 范例二:J=计算机应用与软件 AND (U=C++ OR U=Basic) NOT M=Visual
作 者:赵丽霞[1] 任成波 翟明慧[1] 鲍昕 刘博[3] 赵峻峰[1]
机构地区:[1]河北北方学院附属第一医院肿瘤内科,河北张家口075000 [2]河北北方学院附属第一医院放疗科,河北张家口075000 [3]河北北方学院附属第一医院病理科,河北张家口075000
出 处:《中国老年学杂志》2022年第22期5593-5598,共6页Chinese Journal of Gerontology
基 金:河北省2018年度医学科学研究重点课题计划项目(20180853)。
摘 要:目的探讨微小RNA-374b-5p(miR-374b-5p)靶向血管内皮生长因子(VEGF)C对肺癌细胞迁移、侵袭和上皮-间质转化(EMT)的影响。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)和Western印迹分别检测人支气管上皮BEAS-2B细胞和肺癌A549、H1299、H358细胞中miR-374b-5p、VEGFC蛋白表达水平;采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-374b-5p和VEGFC的靶向关系;将miR-374b-5p mimics(mimics组)及其阴性对照(NC组)转染至H1299细胞中,实时荧光定量PCR检测miR-374b-5p表达水平;另设mimics+pcDNA3.1组(共转染miR-374b-5p mimics和pcDNA3.1空载体质粒)和mimics+VEGFC组(共转染miR-374b-5p mimics和pcDNA3.1-VEGFC过表达质粒),采用划痕实验检测细胞迁移,Transwell小室实验检测细胞侵袭,Western印迹检测VEGFC蛋白和EMT相关蛋白E-钙黏蛋白(cadherin)、N-cadherin和波形蛋白(Vimentin)表达水平。结果与BEAS-2B细胞比较,A549、H1299、H358细胞中miR-374b-5p表达水平明显降低,而VEGFC蛋白表达水平明显升高,且H1299细胞变化最为显著(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验证实miR-374b-5p可与VEGFC靶向结合。与NC组比较,mimics组细胞中miR-374b-5p和E-cadherin蛋白表达水平明显升高,细胞迁移、侵袭能力明显减弱且细胞中VEGFC、N-cadherin、Vimentin蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与mimics+pcDNA3.1组比较,mimics+VEGFC组细胞迁移、侵袭能力明显增强且细胞中VEGFC、N-cadherin、Vimentin蛋白表达水平明显升高,而E-cadherin蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论miR-374b-5p过表达可通过靶向调控VEGFC抑制肺癌H1299细胞迁移、侵袭和EMT。
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