简单异尖线虫重组酶聚合酶等温扩增检测方法的建立  

作　　者：陈德强 孙碧莲 李海登 黄丽 

机构地区：[1]北部湾大学,广西钦州535011 [2]北部湾特色海产品资源开发与高值化利用重点实验室,广西钦州535011

出　　处：《中国食品工业》2023年第2期73-76,共4页China Food Industry

基　　金：广西高校中青年教师科研基础能力提升项目(2019KY0437)。

摘　　要：为建立基于重组酶聚合酶等温扩增(RPA)技术的简单异尖线虫检测方法,本研究根据简单异尖线虫rDNA的ITS2基因序列设计特异引物,建立了简单异尖线虫的RPA检测方法。通过对反应体系的优化确定最优反应温度为40℃和最优反应时间为25 min。特异性检测结果显示,本研究建立的简单异尖线虫RPA检测方法与典型异尖线虫、抹香鲸异尖线虫、宫脂线虫、伪地新线虫和对盲囊线虫无交叉反应;该方法对简单异尖线虫基因组DNA最低检出限为10 pg/μL;人工污染检测结果表明,该方法能在100 g鲈鱼肉中检出单条简单异尖虫的混入污染,应用效果良好。因此,本研究所建立的简单异尖线虫RPA检测方法特异性强、灵敏度高、反应快速、无需昂贵设备,可应用于基层单位和现场快速检测。

关 键 词：简单异尖线虫 重组酶聚合酶等温扩增 检测 

分 类 号：TS254.7[轻工技术与工程—水产品加工及贮藏工程]