Circ-ZNF609通过miR-224-5p调控食管癌细胞生物学特性的作用机制  

作　　者：连利霞[1,2,3] 朱琰琰 吴广银 牛坡[1,2,3] 高未华 

机构地区：[1]河南省人民医院,河南郑州450000 [2]郑州大学人民医院 [3]河南大学人民医院

出　　处：《中国老年学杂志》2023年第7期1645-1650,共6页Chinese Journal of Gerontology

基　　金：河南省自然科学基金(182300410376)。

摘　　要：目的探讨Circ-ZNF609对食管癌细胞生物学特性影响及作用机制。方法体外培养正常食管内皮细胞NEC与食管癌细胞系Eca-109、KYSE30、KYSE-450,实验分组:NC(空白)组、si-NC(转染si-NC)组、si-Circ-ZNF609(转染si-Circ-ZNF609)组、miR-NC(转染miR-NC)组、miR-224-5p(转染miR-224-5p)组、si-Circ-ZNF609+anti-miR-NC(同时转染si-CircZNF609和anti-miR-NC)组、si-Circ-ZNF609+anti-miR-224-5p(同时转染si-CircZNF609和anti-miR-224-5p)组;采用实时荧光(qRT)-聚合酶链反应(PCR)检测Circ-ZNF609、miR-224-5p表达量;采用Western印迹检测细胞周期素蛋白(Cyclin)D1、裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Cleaved-caspase)-3、β-catenin蛋白表达;采用噻唑蓝(MTT)法和流式细胞仪分别检测细胞活力、细胞周期和凋亡率;双荧光素酶报告基因实验鉴定靶向关系。结果与正常食管内皮细胞NEC比较,食管癌细胞Eca-109、KYSE30、KYSE-450中Circ-ZNF609表达水平明显升高,miR-224-5p表达水平明显降低(P<0.05);与si-NC组比较,si-Circ-ZNF609组细胞活力与S期细胞比例明显降低(P<0.05),G2/M期细胞明显比例升高(P<0.05),CyclinD1、β-catenin蛋白水平明显降低,凋亡率和Cleaved-caspase-3蛋白表达明显增加(均P<0.05);与miR-NC组比较,miR-224-5p组细胞活力与S期细胞比例明显降低,G2/M期细胞比例明显升高,CyclinD1、β-catenin蛋白水平明显降低,凋亡率和Cleaved-caspase-3蛋白产生明显增加(P<0.05);Circ-ZNF609可靶向调控miR-224-5p;抑制miR-224-5p表达可逆转Circ-ZNF609沉默对食管癌细胞生物学行为的作用。结论干扰Circ-ZNF609能够通过促进miR-224-5p表达而调控食管癌细胞生物学特性,此影响可能涉及Wnt/β-catenin信号通路的失活。

关 键 词：Circ-ZNF609 miR-224-5p 食管癌 增殖 凋亡 

分 类 号：R735.1[医药卫生—肿瘤]