致病疫霉酵母双杂交cDNA文库的构建及鉴定  

Construction and identification of yeast two-hybrid cDNA library of phytophthora infestans

作　　者：陈泓妃 顾赛汝 王洪洋 李灿辉[1] 刘晶 Chen Hongfei

机构地区：[1]云南师范大学云南省马铃薯生物学重点实验室/云南师范大学云南省高校马铃薯生物学重点实验室,云南昆明650500

出　　处：《江苏农业科学》2023年第13期60-64,共5页Jiangsu Agricultural Sciences

基　　金：云南省基础研究计划(编号:202001AU070091、202005AE160015);国家自然科学基金(编号:32101665);广东省基础与应用基础研究重大项目(编号:2021B0301030004);云南师范大学大学生科研训练基金(编号:KX2021109)。

摘　　要：致病疫霉是引起马铃薯晚疫病的重要病原菌,在全世界范围内造成了严重的经济损失。以2种不同致病力的致病疫霉菌株侵染马铃薯叶片5个时间点的混合菌丝样品作为cDNA文库的材料来源,利用Gateway法分别构建了初级文库与次级文库,初级文库与次级文库的库容量分别为1.60×10~7、1.52×10~7 CFU,插入片段长度大多在1000~2000 bp之间,重组率均达到100%。次级文库质粒转化酵母菌构建酵母文库,所得酵母文库滴度为1.00×10~8 CFU/mL,转化效率为6×10~8 CFU/μg。结果表明,本研究构建的酵母双杂交cDNA文库质量较高,完全可以满足互作蛋白高质量、高效率筛选的要求。该文库为后续深入解析致病疫霉的致病机制奠定了基础。

关 键 词：致病疫霉 马铃薯 酵母双杂交 CDNA文库 

分 类 号：S435.32[农业科学—农业昆虫与害虫防治]