对映-贝壳杉烯型二萜类化合物J32对胰腺癌细胞的作用及机制  

Effect and mechanism of ent-kaurene diterpenoid J32 on pancreatic cancer cells

作　　者：刘胜[1] 赵梦圆 金巍 段长恩 可钰[3] LIU Sheng;ZHAO Mengyuan;JIN Wei;DUAN Changen;KE Yu(Department of General Surgery,the First Affiliated Hospital of Xinxiang Medical University,Weihui 453100,Henan Province,China;Henan Medical and Health Technician College,Kaifeng 475006,Henan Province,China;College of Pharmacy,Zhengzhou University,Zhengzhou 450001,Henan Province,China)

机构地区：[1]新乡医学院第一附属医院普通外科,河南卫辉453100 [2]河南医药健康技师学院,河南开封475006 [3]郑州大学药学院,河南郑州450001

出　　处：《新乡医学院学报》2023年第9期810-817,共8页Journal of Xinxiang Medical University

基　　金：国家自然科学基金河南省联合基金项目(编号:U1904163)。

摘　　要：目的探讨对映-贝壳杉烯型二萜类化合物J32对胰腺癌细胞SW1990的作用及机制。方法将SW1990细胞随机分为对照组、0.5μmol·L^(-1) J32组、1.0μmol·L^(-1) J32组、2.0μmol·L^(-1) J32组、4.0μmol·L^(-1) J32组,分别用含终浓度0.0、0.5、1.0、2.0、4.0μmol·L^(-1) J32的培养基培养。采用细胞划痕试验检测细胞迁移能力,单克隆形成试验检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡情况、细胞中活性氧水平及细胞周期,磷酸化H2组蛋白家族成员X(γ-H2AX)免疫荧光法检测细胞DNA损伤程度,Western blot法检测共济失调毛细血管扩张和Rad3相关蛋白(ATR)-细胞周期检查点激酶1(Chk1)-p53-细胞周期素D1(Cyclin D1)通路相关蛋白以及凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)、caspase-3、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)表达。结果培养24、48 h时,1.0μmol·L^(-1) J32组、2.0μmol·L^(-1) J32组、4.0μmol·L^(-1) J32组细胞的迁移能力显著低于对照组(P<0.05),2.0μmol·L^(-1) J32组、4.0μmol·L^(-1) J32组细胞的迁移能力均显著低于1.0μmol·L^(-1) J32组(P<0.05),4.0μmol·L^(-1) J32组细胞的迁移能力显著低于2.0μmol·L^(-1) J32组(P<0.05)。0.5μmol·L^(-1) J32组、1.0μmol·L^(-1) J32组细胞的增殖能力显著低于对照组(P<0.05),1.0μmol·L^(-1) J32组细胞的增殖能力显著低于0.5μmol·L^(-1) J32组(P<0.05)。1.0μmol·L^(-1) J32组、2.0μmol·L^(-1) J32组、4.0μmol·L^(-1) J32组细胞的凋亡率显著高于对照组(P<0.05),2.0μmol·L^(-1) J32组、4.0μmol·L^(-1) J32组细胞的凋亡率显著高于1.0μmol·L^(-1) J32组(P<0.05),4.0μmol·L^(-1) J32组细胞的凋亡率显著高于2.0μmol·L^(-1) J32组(P<0.05)。1.0μmol·L^(-1) J32组、2.0μmol·L^(-1) J32组、4.0μmol·L^(-1) J32组细胞的活性氧水平显著高于对照组(P<0.05),2.0μmol·L^(-1) J32组、4.0μmol·L^(-1) J32组细胞的活性氧水平显著高于1.0μmol·L^(-1) J32组(P<0.05),4.0μmol·L^(-1) J32组细胞的活性氧水平显著高于2.0μmol�Objective To investigate the effect and mechanism of ent-kaurene diterpenoid J32 on pancreatic cancer cell SW1990.Methods The SW1990 cells were randomly divide into the control group,0.5μmol·L^(-1) J32 group,1.0μmol·L^(-1) J32 group,2.0μmol·L^(-1) J32 group,4.0μmol·L^(-1) J32 group,and were cultured with medium containing final concentrations of 0.0,0.5,1.0,2.0 and 4.0μmol·L^(-1) J32,respectively.The cell migration ability was detected by cell scratch assay;the cell proliferation ability was detected by monoclonal formation assay;the cell apoptosis,reactive oxygen species level in cells and cell cycle were detected by flow cytometry;the degree of cellular DNA damage was detected by phosphorylated H2A histone family member X(γ-H2AX)immunofluorescence assay;the expressions of ataxia telangiectasia and Rad3 related protein(ATR)-checkpoint kinase 1(Chk1)-p53-CyclinD1 pathway related proteins,apoptosis related proteins B-cell lymphoma-2 associated X protein(Bax),caspase-3,B-cell lymphoma-2(Bcl-2)were detected by Western blot.Results At 24 and 48 hours of cultivation,the migration abilities of cells in the 1.0μmol·L^(-1) J32 group,2.0μmol·L^(-1) J32 group,4.0μmol·L^(-1) J32 group were significantly lower than those in the control group(P<0.05);the migration abilities of cells in the 2.0μmol·L^(-1) J32 group,4.0μmol·L^(-1) J32 group were significantly lower than those in the 1.0μmol·L^(-1) J32 group(P<0.05);the migration ability of cells in the 4.0μmol·L^(-1) J32 group was significantly lower than that in the 2.0μmol·L^(-1) J32 group(P<0.05).The proliferation ability of cells in the 0.5μmol·L^(-1) J32 group,1.0μmol·L^(-1) J32 group were significantly lower than those in the control group(P<0.05);the proliferation ability of cells in the 1.0μmol·L^(-1) J32 group was significantly lower than that in the 0.5μmol·L^(-1) J32 group(P<0.05).The cell apoptosis rates of cells in the 1.0μmol·L^(-1) J32 group,2.0μmol·L^(-1) J32 group,4.0μmol·L^(-1) J32 group were significantly higher than t

关 键 词：对映-贝壳杉烯型二萜 DNA损伤 增殖 迁移 凋亡 活性氧 共济失调毛细血管扩张和Rad3相关蛋白-细胞周期检查点激酶1-p53-Cyclin D1通路 

分 类 号：R735.9[医药卫生—肿瘤]