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作 者:闻胜月 庞坚[1] 张旻[1] 林勋[2] 曹月龙[1] 陈博[1] 詹红生[1]
机构地区:[1]上海中医药大学附属曙光医院石氏伤科医学中心,上海201203 [2]上海中医药大学,上海201203
出 处:《时珍国医国药》2023年第8期1841-1844,共4页Lishizhen Medicine and Materia Medica Research
基 金:国家自然科学基金项目(81774340,81973875);上海市科技创新行动计划医学创新研究专项(21Y11921600);上海市慢性筋骨病临床医学研究中心(20MC1920600);上海市中医非药物疗法示范中心建设项目(ZY(2021-2023)-0204);上海市高水平大学建设项目(中医药标准化引领战略ZYYBZH-202004)。
摘 要:目的探讨石氏熏洗方药浴对膝骨关节炎(Knee Osteoarthritis,KOA)兔模型软骨细胞凋亡的影响。方法50只新西兰兔随机分成假手术组(6只)、模型组(6只)、石氏熏洗方药浴(45℃、40℃、35℃)组(16只)、纯净水浴(45℃、40℃、35℃)组(16只)、扶他林乳胶剂组(6只)。使用前交叉韧带横断术建立KOA兔模型。造模4周后,每组随机获取1只动物的软骨组织进行苏木精-伊红染色(Hematoxylin-Eosin staining,HE)来判断模型是否成功建立。成功建模后,石氏熏洗方药浴组和纯净水浴组分别予以石氏熏洗方药浴和纯净水浴各30 min,1次/d;扶他林乳胶剂组予以扶他林乳胶剂外涂2 min,2次/d,连续干预4周后取材。借助透射电子显微镜观察软骨细胞的微观结构。应用Annexin V-PI双染法和TdT介导的dUTP缺口末端标记(Tunel染色)后计算软骨细胞凋亡指数(Apoptosis Index,AI),使用Real-Time PCR法检测B淋巴细胞瘤分子-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)、B淋巴细胞瘤分子-2(Bcell lymphoma-2,Bcl-2)、和门冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Cysteinyl aspartate-specific cysteine protease-3,Caspase-3)的表达。结果与Sham组相比,造模4周后的模型组和各干预组软骨细胞数量减少且排列紊乱,说明造模成功。石氏熏洗方药浴40℃亚组的兔膝关节软骨细胞破坏程度和胶原纤维紊乱程度、AI指数、Bax、Caspase-3的mRNA高于Sham组但低于模型组;Bcl-2的mRNA的表达高于模型组和假手术组(P<0.05)。结论石氏熏洗方药浴在40℃条件下通过上调Bcl-2的表达和下调Bax、Caspase-3的mRNA表达,来抑制KOA兔模型软骨细胞的凋亡,减轻对KOA兔模型关节软骨的破坏。
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