基于生物膜探讨清髓消炎汤对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的抑菌作用及其机制研究  

作　　者：钱亚男 吕秋霞[3] 李扬[3] 陈乾 曹玉净[1,2,3] 

机构地区：[1]河南中医药大学,河南郑州450046 [2]河南中医药大学骨伤学院,河南郑州450002 [3]河南中医药大学第二附属医院,河南郑州450053

出　　处：《时珍国医国药》2023年第10期2377-2382,共6页Lishizhen Medicine and Materia Medica Research

基　　金：国家自然科学基金(82104833);河南省中医药科学研究专项课题(2023ZY1008,2019ZYBJ15)。

摘　　要：目的 研究清髓消炎汤(Qingsui XiaoyanDecoction, QSXYD)对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA)毒力和生物膜的影响,探讨QSXYD对MRSA的体外抑菌机制。方法 采用微量肉汤稀释法检测QSXYD对MRSA的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),在此基础上绘制24h的时间-生长曲线;选择亚抑菌浓度(sub-MIC)观察QSXYD对MRSA的H2O2敏感性;XTT实验检测QSXYD对MRSA生物被膜内的活菌量,评估QSXYD对MRSA生物被膜的代谢活性;扫描电镜(SEM)检测QSXYD对MRSA形态学的影响;激光共聚焦(CLSM)检测QSXYD对MRSA生物膜内细菌活力的影响;实时荧光定量(Real-time PCR)检测sub-MIC QSXYD对MRSA对生物膜形成基因icaA、icaB、icaC、icaR表达的影响。结果 QSXYD对MRSA的MIC和MBC分别是31.3mg/mL和62.5mg/mL;QSXYD能够增强H2O2对MRSA的敏感性(P<0.05);QSXYD影响MRSA生物被膜(MRSA-BF)内的活菌量和生物被膜的代谢活性,并呈现剂量依赖(P<0.05);SEM显示QSXYD影响细菌的个体大小、结构疏密程度、菌体表面的形态;CLSM结果显示MRSA活菌量随着QSXYD浓度增加而减少,MRSA死菌量随着QSXYD浓度增加而增加;RT-PCR结果显示sub-MIC浓度的QSXYD可明显抑制MRSA生物膜形成相关基因的表达(P<0.05)。结论 QSXYD主要通过干扰生物膜形成基因,破坏细菌的生物膜,抑制MRSA的生长和繁殖。

关 键 词：骨髓炎 清髓消炎汤 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 抑菌 生物膜 

分 类 号：R285.5[医药卫生—中药学]