纤维二糖水解酶在乳酸乳球菌中的表达  

作　　者：黄凯 何启杰[1,2] 陈樱 欧阳康[2] 黄伟坚[2] 彭昊[1,3] 韦祖樟[2] 李军 

机构地区：[1]广西兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室,广西南宁530005 [2]广西大学动物科学技术学院动物传染病与分子免疫学实验室,广西南宁530005 [3]农业农村部中国(广西)-东盟跨境动物疫病防控重点实验室,广西南宁530005

出　　处：《云南畜牧兽医》2024年第1期1-4,共4页

基　　金：广西兽医生物技术重点实验室开放基金(19-50-40-B-05)。

摘　　要：为在乳酸乳球菌中表达纤维二糖水解酶II(CBH II)基因,对绿色木霉(T.reesei)CBH II基因序列进行密码子优化和合成,通过PCR及T4 DNA连接酶将人工合成的序列插入到表达载体pNZ8148中,获得重组质粒pNZ8148-CBH II,重组质粒经双酶切及测序鉴定正确后,将正确的重组质粒通过电击转化进入乳酸菌NZ3900感受态细胞,通过选择性抗生素氯霉素筛选阳性克隆,放大培养后使用终浓度为20 ng/mL的Nisin进行诱导表达,诱导后的菌液经SDS-PAGE鉴定,有符合预期大小的条带,说明CBH II基因在乳酸乳球菌NZ3900中表达。研究为乳酸乳球菌的改造及开发临床应用奠定基础。

关 键 词：纤维二糖水解酶 克隆 乳酸乳球菌 表达 

分 类 号：TS201.3[轻工技术与工程—食品科学]