不同抗原表位CART-30细胞对经典型霍奇金淋巴瘤细胞株的杀伤作用及优化研究  

作　　者：邹丹丹 张苗 齐霄 邱鸣寒 杨臻 王华庆[1] 

机构地区：[1]天津市人民医院/南开大学人民医院肿瘤科,南开大学人民医院转化医学研究院,天津300121

出　　处：《癌症》2023年第11期599-606,共8页Chinese Journal of Cancer

摘　　要：背景与目的CD30-CART细胞现已应用于复发/难治性CD30阳性的经典霍奇金淋巴瘤(classical hodgkin lymphoma,cHL)患者中并取得一定疗效,但其疗效仍待进一步提高,本研究选择不同抗原表位的两种单克隆抗体Ki-4和Ber-H2,优化性构建不同CAR基因片段载体,探讨两种CART细胞对CD30阳性的cHL细胞L428的杀伤作用及其作用机制。方法构建携带不同抗原表位的CD30-CAR基因片段的慢病毒载体,通过流式细胞检测技术比较两种不同抗原表位CART-30细胞对cHL细胞的杀伤作用,采用蛋白质免疫印迹法(western blotting,WB)分析不同抗原表位的CART-30细胞对cHL细胞NF-κB通路的调控作用。结果成功构建了不同抗原表位的CD30-CART细胞,平均阳性率为65.7%。Ki-4组效靶比为1∶1时,杀伤效率平均值为(35.15±4.13)%(n=6);效靶比为10∶1时,杀伤效率的平均值为(66.99±4.36)%(n=6)。Ber-H2组效靶比为1∶1时,杀伤效率的平均值为(31.95±3.11)%(n=6);效靶比为10∶1时,杀伤效率的平均值为(56.11±2.73)%(n=6)。CD19组效靶比为1∶1时,杀伤效率的平均值为(21.92±2.14)%(n=6);效靶比为10∶1时,杀伤效率的平均值为(45.49±5.31)%(n=6)。CIK组效靶比为1∶1时,杀伤效率的平均值为(16.99±0.79)%(n=6);效靶比为10∶1时,杀伤效率的平均值为(32.22±2.11)%(n=6)(P<0.001)。WB结果显示,TNF-α组及Ki-4的2 h和3 h组的磷酸化P65表达呈强阳性,IκBα蛋白表达呈弱阳性;而空白对照组、Ki-4的0 h组、Ber-H2各组的磷酸化P65和IκBα蛋白表达均呈弱阳性。结论不同抗原表位的CD30-CART细胞对经典型霍奇金淋巴瘤细胞杀伤作用不同;Ki-4的单链可变区片段能有效激活NF-κB,但Ber-H2-CARs不能激活NF-κB。

关 键 词：霍奇金淋巴瘤 嵌合抗原受体 CD30 Ki-4 Ber-H2 

分 类 号：R733.1[医药卫生—肿瘤]