龙胜凤鸡TBX5基因克隆、生物信息学分析及过表达载体构建  

作　　者：刘雍翠 杜文娅 杨祝良[1] 杨雪琴 袁虹 李福球 黎剑能 杨秀荣[1,3] 

机构地区：[1]广西大学动物科学技术学院,广西南宁530004 [2]广西贵港市港丰农牧有限公司,广西贵港537100 [3]广西畜禽繁育与疾病防控重点实验室,广西南宁530004

出　　处：《中国畜牧杂志》2024年第5期167-171,共5页Chinese Journal of Animal Science

基　　金：广西重点研发计划(桂科AB21075010)。

摘　　要：试验旨在探究TBX5(T-box Transcription Factor 5)基因在有、无毛脚鸡品种不同组织中的表达模式,并对其进行克隆、生物信息学分析及过表达载体构建。利用QRT-PCR检测TBX5基因在有、无毛脚鸡不同组织中的相对表达量;通过PCR扩增获得TBX5的CDS序列,并利用生物信息学软件对其序列及蛋白结构进行分析;通过双酶切构建TBX5过表达载体并利用QRT-PCR检测TBX5过表达效率。结果表明,相比广西麻鸡(鳞片脚),TBX5基因在龙胜凤鸡(毛脚)胫部特异性高表达;龙胜凤鸡TBX5基因CDS区全长1566bp,共编码521个氨基酸,与参考序列相比,存在3处同义突变及1处错义突变(c.296A>G引起蛋氨酸变为丙氨酸);同源性分析表明龙胜凤鸡TBX5基因与其他禽类的同源性均在92.8%以上;TBX5蛋白属于不稳定亲水性蛋白,不存在跨膜结构域和信号肽,蛋白二级结构由α-螺旋、β-折叠、延伸链及无规则卷曲组成,三级结构主要由无规则卷曲及延伸链构成。本试验成功构建了pEGFP-TBX5过表达载体,QRT-PCR结果显示TBX5在过表达组极显著高于对照组。本研究结果为后续探究TBX5基因在鸡毛脚性状中的作用提供了理论基础。

关 键 词：龙胜凤鸡 TBX5基因 生物信息学分析 过表达载体 

分 类 号：S831.2[农业科学—畜牧学]