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作 者:陈鹏[1] 侯贺斌[1] 朱曙光[1] 李曙晖[1] 崔梅
机构地区:[1]济宁医学院附属滕州市中心人民医院消化内科,山东滕州277599
出 处:《中国卫生工程学》2024年第2期251-255,258,共6页Chinese Journal of Public Health Engineering
基 金:济宁医学院教师科研扶持基金(JYFC2019FKJ031)。
摘 要:目的探讨凋亡抑制蛋白Livin基因对肝癌Huh7细胞增殖活性和放射敏感性的影响,分析可能的作用机制。方法采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测法检测不同剂量(0、2、4、6、8 Gy)照射后肝癌Huh7细胞中Livin mRNA表达水平,通过慢病毒感染构建沉默Livin的肝癌Huh7细胞株,将对数期的肝癌Huh7细胞分为空白对照(Blank)组、阴性对照(si-NC)组和Livin沉默(si-Livin)组,采用qPCR和Western blot验证Livin沉默效果。将接受剂量为4 Gy照射的si-NC组和si-Livin组肝癌Huh7细胞分别记为si-NC+4Gy组及si-Livin+4Gy组,CCK-8法和集落形成实验检测细胞存活情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot分析Livin信号通路相关蛋白表达水平。结果经不同X射线照射剂量(0、2、4、6、8 Gy)照射后肝癌Huh7细胞中Livin mRNA表达水平分别为1.00±0.10、1.18±0.11、1.76±0.15、2.51±0.24、3.94±0.35,与0 Gy比较,照射剂量为4、6、8 Gy时Livin mRNA表达水平显著上调,差异均有统计学意义(t=0.80、1.20、2.30,均P<0.05)。Blank组Livin mRNA和蛋白表达量分别为1.00±0.10、0.56±0.06,si-NC组Livin mRNA和蛋白表达量分别为0.95±0.11、0.55±0.05,si-Livin组Livin mRNA和蛋白表达量分别为0.24±0.02、0.20±0.02。Blank组和si-NC组Livin mRNA和蛋白表达量比较差异均无统计学意义(均P>0.05),si-Livin组Livin mRNA和蛋白表达量均明显低于si-NC组,差异均有统计学意义(t=3.25、4.17,均P<0.05)。si-NC组、si-Livin组、si-NC+4 Gy组、si-Livin+4 Gy组集落形成率分别为(95.22±3.12)%、(70.28±4.06)%、(59.04±4.33)%、(37.81±3.80)%。与si-NC组比较,si-Livin组集落形成率明显降低;与si-NC+4 Gy组比较,si-Livin+4 Gy组集落形成率也明显降低,上述差异均有统计学意义(t=26.01、25.02,均P<0.05)。si-NC组、si-Livin组、si-NC+4 Gy组、si-Livin+4 Gy组细胞凋亡率分别为(4.58±1.06)%、(19.39±2.24)%、(20.18±2.11)%、(34.69±4.52)%。与si-NC组比较,si-Livin组细胞凋亡率明显升高;�
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