牛支原体重组融合膜蛋白基因M27-498原核表达载体的构建  

Construction of Prokaryotic Expression Vector for Recombinant Fusion Membrane Protein Gene M27-498 of Mycoplasma bovis

作　　者：冉芳菲 成虹松 朱二鹏 胡茜 杨利利 申艳娟 赵依琳 李广松 胡鹏飞 黄荣生 何玲 郝明祥 程振涛 Ran Fangfei

机构地区：[1]贵州大学动物科学学院,贵州贵阳550025 [2]盘州市动物疫病预防控制中心,贵州盘州553500 [3]思南县畜牧发展中心,贵州思南565100

出　　处：《贵州畜牧兽医》2024年第3期25-29,共5页Guizhou Journal of Animal Husbandry & Veterinary Medicine

基　　金：“牛支原体多基因融合膜蛋白亚单位疫苗构建”大学生创新创业训练计划项目(贵大[省]创字2022[099]号);“贵州省牛羊支原体肺炎综合防控技术研究与示范”贵州省科技计划项目(黔科合支撑[2021]一般161号);“动物病原分子特征与致病机理研究”贵州省优秀青年科技人才项目(黔科合平台人才[2021]5646号)。

摘　　要：为构建牛支原体融合膜蛋白原核表达载体,使用SOE-PCR技术融合M27、M498基因并扩增融合基因M27-498,利用基因克隆技术构建pMD19-T-M27-498双基因克隆载体,通过亚克隆技术将融合基因M27-498克隆至表达载体pColdⅠ,构建pColdⅠ-M27-498原核表达载体。结果:SOE-PCR产物的电泳条带约1167 bp,与融合基因M27-498片段相符;经PCR、双酶切、测序鉴定,重组质粒pMD19-T-M27-498、pColdⅠ-M27-498的DNA均包含融合基因M27-498。结论:pColdⅠ-M27-498原核表达载体构建成功,可为牛支原体亚单位疫苗的研发奠定基础。

关 键 词：牛支原体 融合基因 SM27 M498 原核表达 

分 类 号：S852.62[农业科学—基础兽医学] Q78[农业科学—兽医学]