EGCG通过Nrf2/HO-1信号通路延缓内皮细胞衰老的实验研究  

Experimental study on EGCG delaying endothelial cell senescence via Nrf2/HO-1 signaling pathway

作　　者：张颖杰 王绫欢 马焱 王天虎 谷政慧 房之沂 沈晓影 元媛 田磊 曹丰 ZHANG Ying-jie;WANG Ling-huan;MA Yan;WANG Tian-hu;GU Zheng-hui;FANG Zhi-yi;SHEN Xiao-ying;YUAN Yuan;TIAN Lei;CAO Feng(Medical School of Chinese PLA&Department of Cardiology,the Second Medical Center,Chinese PLA General Hospital,Beijing 100853,China;National Clinical Research Center for Geriatric Diseases,Beijing 100853,China;Department of Clinical Medicine,School of Medicine,Nankai University,300071 Tianjin,China)

机构地区：[1]解放军医学院&解放军总医院第二医学中心心血管内科,北京市100853 [2]国家老年疾病临床医学研究中心 [3]南开大学医学院临床医学系

出　　处：《中国心血管病研究》2024年第6期571-576,共6页Chinese Journal of Cardiovascular Research

基　　金：国家自然科学基金重大研究计划集成项目(92249301);科技部重点专项(2022YFC3602400);中央保健科研课题(2020ZD05)。

摘　　要：目的 探讨表没食子儿茶素没食子酸酯[(-)-epigallocatechin-3-gallate,EGCG]对延缓多柔比星(doxorubicin,Dox)诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)衰老的作用及机制。方法 2023年4~12月于解放军总医院第二医学中心老年医学研究所体外培养HUVEC,分为对照组、Dox(2 μmol/L)组、Dox+EGCG(50 μmol/L)组、Dox+EGCG+ML385(Nrf2特异性抑制剂,2.5 μmol/L)组,采用β-半乳糖苷酶(β-gal)染色检测细胞衰老,活性氧(reactive oxygen species,ROS)染色检测细胞内ROS含量,超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒及丙二醛(MDA)含量检测试剂盒检测SOD活力和MDA含量,CCK-8实验检测细胞活力以及Western blot检测细胞内衰老相关蛋白(P21和P53)、核因子e2相关因子2(nuclear factor-E2-related factor 2,Nrf2)、血红素加氧酶1(heme oxygenase 1,HO-1)蛋白水平。结果 浓度(10,30,50)μmol/L的EGCG处理HUVEC 48 h不影响细胞活力,而浓度(70,100,300)μmol/L的EGCG预处理后细胞活力下降,因此选择50 μmol/L作为后续使用浓度。与对照组比较,Dox组β-gal阳性率和ROS水平显著增加(P<0.05),P21和P53蛋白表达增高(P<0.05),加入EGCG后β-gal阳性率以及ROS水平明显降低(P<0.05),SOD活性提高(P<0.05),MDA含量下降(P<0.05),同时P21和P53蛋白表达量降低(P<0.05),Nrf2和HO-1显著增加(P<0.05)。ML385组可逆转EGCG的细胞抗衰老效应,表现为Nrf2和HO-1表达量降低(P<0.05),而P21和P53蛋白表达量增加(P<0.05)。结论 EGCG可能通过激活Nrf2/HO-1通路延缓Dox诱导的HUVEC衰老效应。

关 键 词：表没食子儿茶素没食子酸酯 人脐静脉内皮细胞 衰老 NRF2 HO-1 

分 类 号：Q95-33[生物学—动物学] R54[医药卫生—心血管疾病]