鼠源抗VISTA重组蛋白单克隆抗体的制备  

Preparation of Mouse Derived Monoclonal Antibodies Against Recombinant VISTA Protein

作　　者：旷怡 仝爱平[2] Kuang Yi

机构地区：[1]贵州省天然产物研究中心,贵州贵阳550014 [2]四川大学生物治疗国家重点实验室,四川成都610064

出　　处：《贵州畜牧兽医》2024年第5期40-45,共6页Guizhou Journal of Animal Husbandry & Veterinary Medicine

基　　金：“Long Non-coding RNA(CNCR)在乳腺癌中的生物功能特征鉴定及其调控自噬途径的分子机制研究”贵州省科技厅一般项目(黔科合基础-ZK[2022]一般297)。

摘　　要：为了对VISTA抗体药物的研发奠定基础,试验利用真核表达系统表达VISTA胞外段重组蛋白,并采用Ni-NTA亲和层析法纯化该蛋白,用其作为免疫原免疫BALB/c小鼠后,经过细胞融合和杂交瘤单克隆筛选,制备VISTA单克隆抗体。结果:通过真核表达系统成功表达VISTA重组蛋白,其分子量约70 kD。用纯化VISTA蛋白免疫小鼠后血清效价达到1∶51200,通过杂交瘤技术获得1株可稳定分泌抗VISTA单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞4H7,经抗体亚型鉴定,制备的VISTA单克隆抗体为IgG1亚型。结论:利用真核表达系统表达及纯化VISTA重组蛋白,并通过杂交瘤技术成功制备了鼠源抗VISTA单克隆抗体,纯度高,为IgG1亚型。

关 键 词：免疫检查点 VISTA 重组蛋白 杂交瘤技术 单克隆抗体 

分 类 号：Q816[生物学—生物工程]