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作 者:王秀燕 郑力宇 WANG Xiuyan;ZHENG Liyu
机构地区:[1]温州市人民医院消化内科,325000 [2]温州医科大学附属第二医院康复科,325000
出 处:《国际消化病杂志》2024年第5期347-352,共6页International Journal of Digestive Diseases
基 金:温州市科学技术局项目(Y2020948)。
摘 要:目的探讨乙醇刺激对小鼠肝细胞中miR-378、细胞色素P450家族成员2E1(CYP2E1)、过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)表达的影响,以及miR-378对小鼠酒精性肝细胞损伤的作用。方法培养小鼠正常肝细胞系AML12,分别转染过表达miR-378病毒、抑制miR-378病毒和阴性对照病毒,均用100μmoL/L乙醇刺激24 h,分别设为正常组、乙醇组、过表达miR-378+乙醇组、抑制miR-378+乙醇组和乙醇+阴性对照组。采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞中miR-378表达水平,采用蛋白质印迹法检测各组细胞中CYP2E1、PPAR-α蛋白表达水平。检测各组细胞中氧化应激水平指标还原性谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)表达水平。采用MTT法检测各组细胞的活力。结果乙醇组细胞中miR-378表达水平较正常组显著降低(P<0.05)。与乙醇组相比,过表达miR-378+乙醇组细胞中CYP2E1蛋白表达水平显著降低(P<0.05),PPAR-α蛋白表达水平显著升高(P<0.05);而抑制miR-378+乙醇组细胞中CYP2E1蛋白表达水平显著升高(P<0.05),PPAR-α蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。与乙醇组相比,过表达miR-378+乙醇组细胞中GSH表达水平显著升高(P<0.05),MDA表达水平显著降低(P<0.05);而抑制miR-378+乙醇组细胞中GSH表达水平显著降低(P<0.05),MDA表达水平显著升高(P<0.05)。与乙醇组相比,过表达miR-378+乙醇组细胞活力显著增强(P<0.05),而抑制miR-378+乙醇组细胞活力显著减弱(P<0.05)。结论miR-378表达升高可减轻乙醇对小鼠肝细胞的损伤,这可能是与miR-378通过调控CYP2E1、PPAR-α表达来影响脂质代谢、改善氧化应激及增强细胞活力有关。
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