猪细小病毒NS蛋白的原核表达纯化及多克隆抗体的制备  

作　　者：聂晓宁 单靖微 陈龙欣[1] 孙悦 田梦雪 孔莉 张丽萌[1] 

机构地区：[1]郑州师范学院分子生物学实验室,河南郑州450044

出　　处：《畜禽业》2024年第12期1-4,共4页Livestock and Poultry Industry

基　　金：河南省科技厅科技发展计划(科技攻关)项目(232102311138);河南省高校科技创新人才支持计划(22HASTIT041);郑州师范学院大学生科研创新基金(DCY2023006);河南省大学生创新创业训练计划项目(国家级)(202312949004)。

摘　　要：通过构建猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)NS蛋白的原核表达载体,表达纯化重组NS蛋白并制备其多克隆抗体,用于阐明NS蛋白的生物学功能及在PPV病毒复制过程中的作用机制。研究通过扩增PPV的NS目的基因,并利用限制性内切酶Bam HI和Xho I进行双酶切,采用分子克隆构建方法构建至pET28a-sumo-NS,通过加入0.5 mol/L IPTG并设置不同诱导温度进行诱导表达,利用Ni-NTA纯化获得约71 ku的重组NS蛋白。以重组NS蛋白为抗原,混合佐剂皮下注射免疫BALB/c小鼠,获得抗NS的多克隆抗体,检测抗体效价达到1:32000,这将为后续研究PPV病毒复制机制及PPV疫苗的研发提供基础材料。

关 键 词：猪细小病毒(PPV) NS基因 原核表达 蛋白纯化 多克隆抗体 

分 类 号：S852.651[农业科学—基础兽医学]