人结肠癌5-氟尿嘧啶耐药细胞模型的构建及筛选  

作　　者：乐音子[1] 顾云慧 王雅慧 华晓东 丁天雯 颜帅[2] 

机构地区：[1]南京中医药大学附属苏州市中医医院普外科,江苏苏州215009 [2]南京中医药大学附属苏州市中医医院肛肠科,江苏苏州215009

出　　处：《中国老年学杂志》2024年第18期4559-4564,共6页Chinese Journal of Gerontology

基　　金：苏州市第三十二批科技发展计划(医疗卫生科技创新-应用基础研究)项目(SKJY2021136);苏州市姑苏区卫生人才项目(GSWS2020085);南京中医药大学自然科学基金(XZR2020038)。

摘　　要：目的通过构建多种5-氟尿嘧啶(Fu)耐药的人结直肠癌(CRC)细胞株,探讨耐药的CRC细胞的生物学特性与耐药机制。方法采用持续接触浓度递增诱导法建立人CRC SW620、HT-29、HCT116和SW480的5-Fu耐药株,镜下摄片观察耐药的CRC细胞形态;CCK-8分析细胞活力及耐药指数;流式细胞术比较耐药的CRC细胞周期分布差异;实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测ATP结合盒转运蛋白(ABC)G2、多药耐药关联蛋白(MRP)1、P-糖蛋白(gp)、磷酸酶和紧张素同系物(PTEN)和蛋白激酶B(AKT)mRNA表达量;Western印迹检测测MRP1、ABCG2和P-gp蛋白表达量。结果与各自亲本细胞相比,实验所构建的SW620/5-Fu、HT-29/5-Fu、HCT116/5-Fu和SW480/5-Fu在48、72 h时5-Fu处理下,10、20、40和100 mg/ml浓度组细胞抑制率显著降低(P<0.05),72 h耐药指数分别为49.43、5.52、9.07和13.13。随着5-Fu处理浓度的升高,耐药细胞株G0/G1期细胞数量均明显增加(均P<0.05)。与各自的亲本细胞比较,耐药株SW620/5-Fu、HCT116/5-Fu、SW480/5-Fu的MRP1、ABCG2和P-gp mRNA和蛋白表达水平均有统计学差异(P<0.05)。结论采用持续接触浓度递增法成功构建成功建立人CRC细胞系的5-Fu耐药株,为CRC耐药机制和逆转肿瘤耐药研究奠定了基础。

关 键 词：结直肠癌 5-氟尿嘧啶 耐药 P-糖蛋白 

分 类 号：R73[医药卫生—肿瘤]