CircNFATC3通过miR-183-5p/THBS1轴调节胃癌细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭  

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作  者:亓立廷 黄冬梅 王健 王勇 

机构地区:[1]济南市中西医结合医院普外科,山东济南271100 [2]济南市人民医院注射室 [3]济南市中西医结合医院外科

出  处:《中国老年学杂志》2024年第14期3519-3525,共7页Chinese Journal of Gerontology

基  金:济南市科技创新发展计划(202134063)。

摘  要:目的 探讨环状RNA活化T细胞核因子(circNFATC)3通过微小RNA(miR)-183-5p/血小板凝血酶蛋白(THBS)1轴对胃癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的调节作用。方法 实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测胃癌组织circNFATC3、miR-183-5p、THBS1 mRNA表达水平,分析circNFATC3表达与胃癌临床病理特征的关系,筛选出表达差异最大的胃癌细胞系,选择AGS细胞进行干预,将AGS细胞分为:si-NC组(转染si-NC)、si-circNFATC3组(转染si-circNFATC3)、si-circNFATC3+miR-NC inhibitor组(转染si-circNFATC3和miR-NC inhibitor)、si-circNFATC3+miR-183-5p inhibitor组(转染si-circNFATC3和miR-183-5p inhibitor)和ctrl组(未转染);RT-qPCR检测细胞中circNFATC3、miR-183-5p的表达;CCK-8法检测细胞增殖;平板克隆实验检测细胞克隆形成能力;流式细胞术检测细胞凋亡;划痕愈合实验检测细胞迁移;Transwell小室检测细胞侵袭;Western印迹检测细胞中THBS1、增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸蛋白酶(caspase)-3、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9的表达;双荧光素酶报告基因实验分别验证circNFATC3和miR-183-5p、miR-183-5p和THBS1的关系。结果 circNFATC3、THBS1在胃癌组织和细胞中显著高于癌旁组织和GES-1细胞,miR-183-5p表达显著低于癌旁组织和GES-1细胞(P<0.05);circNFATC3表达与分化程度、淋巴结转移相关(P<0.05),与年龄、肿瘤直径、幽门螺杆菌(HP)感染、向远处转移不相关(P>0.05);与ctrl组、si-NC组相比较,si-circNFATC3组AGS细胞的circNFATC3表达、OD450值、克隆细胞数、侵袭数目、划痕愈合率及THBS1、MMP-2、MMP-9和PCNA蛋白表达显著下降,细胞凋亡率、miR-183-5p、Bax和caspase-3表达明显升高(P<0.05);与si-circNFATC3组、si-circNFATC3+miR-NC inhibitor组比较,si-circNFATC3+miR-183-5p inhibitor组AGS细胞的OD450值、克隆细胞数、划痕愈合率、侵袭数目、THBS1、PCNA、MMP-2和MMP-9蛋白表达显著升高(P<0.05),细胞凋亡率、Bax和caspas

关 键 词:环状RNA活化T细胞核因子(circNFATC)3 微小RNA(miR)-183-5p 血小板凝血酶蛋白(THBS)1 胃癌 增殖 凋亡 迁移 侵袭 

分 类 号:R735.2[医药卫生—肿瘤]

 

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