热疗联合吉西他滨通过ROS/JNK通路对膀胱癌细胞凋亡和自噬的影响  

作　　者：李富博[1] 饶井芬 李青山[1] 

机构地区：[1]承德医学院附属医院肿瘤科,河北承德067000

出　　处：《中国老年学杂志》2024年第22期5556-5560,共5页Chinese Journal of Gerontology

基　　金：河北省医学科学课题研究计划(20231360)。

摘　　要：目的探讨热疗联合吉西他滨通过活性氧(ROS)/c-Jun氨基末端激酶(JNK)通路对膀胱癌细胞凋亡和自噬的影响。方法将EJ细胞分为对照组(control)、热疗42℃组(热疗组)、吉西他滨(4 ng/ml)组(吉西他滨组)、热疗42℃+吉西他滨(4 ng/ml)组(联合组)、联合组+N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC,ROS抑制剂)组、联合组+Sp600125(JNK抑制剂)组。噻唑蓝(MTT)检测细胞活性;克隆形成实验检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞凋亡;2′,7′-二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)荧光探针检测细胞ROS水平;透射电镜观察细胞自噬小体形成;Western印迹检测蛋白表达。结果根据MTT实验结果选择42℃热疗和4 ng/ml吉西他滨干预EJ细胞。与control组比较,热疗组、吉西他滨组和联合组EJ细胞活性、P62蛋白表达明显下降,克隆形成数目、细胞凋亡率、ROS水平、自噬小体数量、苄氯素(Beclin)-1、微管相关蛋白1A/1B-轻链(LC3)Ⅱ/Ⅰ蛋白水平、p-JNK/JNK蛋白表达明显上升,其中以联合组干预效果最为显著(P<0.05),与联合组比较,联合组+NAC组、联合组+Sp600125组细胞活性、P62蛋白表达明显上升,克隆形成数目、细胞凋亡率、ROS水平、自噬小体数量、Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白水平、p-JNK/JNK蛋白表达明显下降,通路抑制剂组明显逆转了联合组对于EJ细胞促进自噬和凋亡的作用(P<0.05)。结论热疗联合吉西他滨通过激活ROS/JNK通路,促进膀胱癌细胞EJ细胞凋亡和自噬。

关 键 词：热疗 吉西他滨 活性氧(ROS)/c-Jun氨基末端激酶(JNK)通路 细胞凋亡 自噬 

分 类 号：R737.14[医药卫生—肿瘤]