长链非编码RNA NNT-AS1通过miR-199b-5p/ACTG1轴促进甲状腺癌细胞增殖、侵袭和迁移  

作　　者：刘延彬[1] 左丽娟[1] 辛运超 刘亚超[1] 田泽东 尚小领[1] 

机构地区：[1]河北北方学院附属第一医院耳鼻咽喉头颈外科,河北张家口075000

出　　处：《中国老年学杂志》2024年第20期5010-5015,共6页Chinese Journal of Gerontology

基　　金：河北省卫生健康委员会科研基金项目(20231449)。

摘　　要：目的检测甲状腺癌中长链非编码(Lnc)RNA烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(磷酸)转氨酶-反义RNA(NNT-AS)1通过调控微小(miR)RNA-199b-5p/肌动蛋白γ(ACTG)1表达,研究其对甲状腺癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法将细胞分为正常甲状腺上皮细胞(Nthy-roi 3-1)组、甲状腺癌细胞(TPC-1)组、sh-NC组、sh#1组、sh#2组、NC inhibitor组、miR-199b-5p inhibitor组、sh#1+miR-199b-5p inhibitor组、sh#1+miR-199b-5p inhibitor+si-ACTG1组。甲状腺癌老年大鼠分为对照组、敲低组各10只。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测甲状腺癌组织标本及细胞中RNA NNT-AS1表达;采用5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(Edu)实验对TPC-1细胞增殖进行检测;Transwell实验评估细胞迁移能力;采用末端脱氧核酸末端标记酶介导的核酸内切断(TUNEL)实验对细胞凋亡率进行检测;检索Starbase数据库,并通过双荧光素酶报告基因实验验证LncRNA NNT-AS1和miR-199b-5p,miR-199b-5p和ACTG1的靶向结合关系;Western印迹检测ACTG1蛋白表达。结果相比于Nthy-roi 3-1组,TPC-1组中NNT-AS1表达明显升高(P<0.01);NNT-AS1表达在sh#1和sh#2组中均明显低于sh-NC组(P<0.01);sh#1、sh#2组细胞增殖率、迁移能力明显低于sh-NC组,凋亡率明显高于sh-NC组(P<0.05,P<0.01,P<0.001);肿瘤生长曲线结果显示,从第14天开始,与对照组相比,敲低组中肿瘤生长速度明显降低(P<0.01);第28天对剥离肿瘤称重,结果显示,敲低组中肿瘤质量明显低于对照组(P<0.001);与Nthy-roi 3-1组相比,TPC-1组中miR-199b-5p表达水平明显降低(P<0.01);相较于NC inhibitor组,miR-199b-5p inhibitor与WT-NNT-AS1(野生型)共转染的荧光素酶活性明显升高(P<0.01);与sh-NC组相比,sh#1组中miR-199b-5p水平明显增加(P<0.01);转染miR-199b-5p inhibitor后WT-ACTG1荧光活性明显高于NC inhibitor(P<0.01),但对MUT-ACTG1荧光活性无明显影响(P>0.05);与Nthy-roi 3-1组相比,TPC-1组中ACTG1 mRNA表达水平明显升高(P<0.01);与NC inhibitor组相比,

关 键 词：甲状腺癌 长链非编码(Lnc)RNARNA烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(磷酸)转氨酶-反义RNA(NNT-AS)1 微小(miR)RNA-199b-5p 肌动蛋白γ-1 增殖 侵袭 迁移 

分 类 号：R736.1[医药卫生—肿瘤]